本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔固定抗人CTX特異性抗體，待測(cè)樣本中的細(xì)胞毒素與固相抗體特異性免疫結(jié)合，孵育洗板后加入HRP標(biāo)記二抗形成穩(wěn)定三元免疫復(fù)合物，再次洗板純化體系后加入底物顯色，顯色深淺與CTX含量正相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合精準(zhǔn)定量樣本中細(xì)胞毒素濃度。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人細(xì)胞毒素(CTX)ELISA試劑盒

英文名稱：CTX ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2674

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：檢出限 0.09pg/mL

檢測(cè)范圍：0.17～15pg/mL

反應(yīng)時(shí)間：室溫振蕩孵育 77min，二抗 46min，顯色 18min

保存條件：試劑盒 2～8℃，稀釋標(biāo)準(zhǔn)品不可留存過(guò)夜

顯色系統(tǒng)：雙組份混合顯色底物

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm 為主，600nm 參比波長(zhǎng)

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：7 個(gè)梯度濃度，剔除異?？缀蠓蔷€性擬合

注意事項(xiàng)：毒素樣本具備生物危害性，操作全程佩戴一次性防護(hù)手套
通用注意事項(xiàng)：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會(huì)導(dǎo)致抗原降解，檢測(cè)值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動(dòng)、室溫過(guò)低會(huì)降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見(jiàn)光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會(huì)造成高背景、假陽(yáng)性；拍干時(shí)使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實(shí)驗(yàn)耗材無(wú) DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實(shí)驗(yàn)廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無(wú)明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時(shí)，必須稀釋重測(cè)，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測(cè)限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對(duì)照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說(shuō)明洗滌不充分或試劑污染，實(shí)驗(yàn)作廢重做。

儲(chǔ)存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會(huì)造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

試劑盒室溫平衡 28min，CTX 抗體包被酶標(biāo)板去除保存液，洗滌液洗板 2 遍，拍干微孔殘留液體。

排布孔位：空白對(duì)照孔、倍比標(biāo)準(zhǔn)品孔、細(xì)菌培養(yǎng)上清樣本孔；標(biāo)準(zhǔn)品孔加入 CTX 標(biāo)準(zhǔn)品 55μL，樣本孔加入稀釋上清液 55μL，空白孔添加稀釋緩沖液。

每孔加入 HRP 標(biāo)記二抗 55μL，覆膜封板，37℃孵育 61min。

棄廢液，洗板液注滿每孔靜置 35s 倒掉，洗板 4 次，充分拍干微孔。

加入顯色 A、B 液各 50μL，遮光 37℃顯色 15min。

滴加終止液 50μL，輕微震蕩終止顯色。

450nm 波長(zhǎng)讀數(shù)，定量檢測(cè)細(xì)胞毒素 CTX 濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：