本試劑盒以雙抗體夾心ELISA法為核心檢測(cè)原理，酶標(biāo)板預(yù)包被人irGH特異性捕獲抗體，孵育時(shí)樣本中的免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激素與包被抗體特異性結(jié)合，再加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體形成固相免疫復(fù)合物，洗滌去除殘留游離物質(zhì)后，底物被酶催化產(chǎn)生有色產(chǎn)物，產(chǎn)物顯色深淺與樣本中irGH濃度成正比，通過酶標(biāo)儀讀數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合，可準(zhǔn)確檢測(cè)樣本中irGH的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：＜0.05 mIU/L

檢測(cè)范圍：0.1mIU/L～25mIU/L

反應(yīng)時(shí)間：固相包被板預(yù)溫后樣本孵育 120min，二抗 60min，顯色 15min，總 195min

保存條件：2～8℃避光，板條拆開后剩余板條放入鋁箔袋密封冷藏

顯色系統(tǒng)：TMB 顯色體系，2mol/L H?SO?終止

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm/650nm 雙波長(zhǎng)校準(zhǔn)讀數(shù)

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6 個(gè)校準(zhǔn)品梯度，四參數(shù)擬合，每批次實(shí)驗(yàn)必須同步做標(biāo)準(zhǔn)曲線

注意事項(xiàng)：血清樣本需無溶血，溶血樣本會(huì)干擾抗原抗體結(jié)合
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測(cè)樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

樣本處理：血清樣本常溫融化，離心去除沉淀，按說明書倍數(shù)稀釋；配制 irGH 系列標(biāo)準(zhǔn)品。

微孔板加樣：標(biāo)準(zhǔn)孔、樣本孔、對(duì)照孔分別加樣 100μL，標(biāo)記板條編號(hào)防止混淆。

酶結(jié)合物共加：每孔直接加入辣根過氧化物酶標(biāo)記抗 irGH 抗體 100μL，密封酶標(biāo)板。

溫育反應(yīng)：37℃避光孵育 65min，期間不可開蓋。

洗板步驟：棄去孔內(nèi)液體，加滿洗滌液靜置 30s，拍干，連續(xù)洗滌 5 次。

TMB 顯色：每孔加入顯色 A、B 液各 50μL，避光顯色 14min。

終止檢測(cè)：終止液終止反應(yīng)，450nm 測(cè)定吸光值，計(jì)算樣本 irGH 含量。