本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，酶標板微孔固定抗人CYFRA21-1特異性抗體，樣本中的細胞角蛋白21-1片段與固相抗體特異性結(jié)合，孵育反應后洗除游離雜質(zhì)，加入HRP標記二抗構(gòu)建免疫復合物，再次洗板后進行底物顯色，顯色深淺與CYFRA21-1含量正相關(guān)，通過標準曲線分析實現(xiàn)精準定量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人細胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA試劑盒

英文名稱：CYFRA21-1   Elisa Kit
貨號：Y-E247

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：≤0.03ng/mL

檢測范圍：0.06～6.8ng/mL

反應時間：樣本孵育 96min，二抗 60min，顯色 15min

保存條件：試劑盒 2～8℃冷藏避光，嚴禁冷凍結(jié)冰

顯色系統(tǒng)：增強靈敏度型 TMB 顯色液

檢測波長：450nm 主波長讀數(shù)

標準曲線繪制：設置陰陽對照質(zhì)控，四參數(shù)擬合定量標準曲線

注意事項：肺部炎癥樣本易出現(xiàn)輕度升高，不可單獨作為腫瘤判定依據(jù)
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

試劑盒室溫靜置 30min，CYFRA21-1 雙抗體夾心包被板棄孔內(nèi)保存液，洗滌液洗板 1 次，吸水紙拍干微孔。

設立空白孔、倍比標準品孔、血清樣本孔；標準品孔加入 CYFRA21-1 梯度標準品 60μL，樣本孔加入稀釋血清 60μL，空白孔添加稀釋緩沖液。

每孔加入 HRP 標記配對抗體 60μL，封板膜封閉，37℃濕盒孵育 72min。

掀開封板倒掉廢液，洗滌液浸泡每孔 30s 棄液，連續(xù)洗板 5 次，徹底拍干微孔。

配制顯色工作液每孔加 100μL，避光 37℃顯色 12min。

每孔加注終止液 50μL 混勻終止底物反應。

450nm 酶標儀檢測吸光度，定量 CYFRA21-1 腫瘤標志物水平。
公司正在出售的產(chǎn)品：