本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理,酶標板固相載體包被人Fcγ特異性抗體,待測樣本、標準品中的免疫球蛋白G Fc片段可與包被抗體特異性結(jié)合,加入酶標記配對抗體形成穩(wěn)定夾心復(fù)合物,洗滌去除未結(jié)合組分后,酶催化底物顯色,終止反應(yīng)后檢測OD值,結(jié)合標準曲線回歸公式,定量測定樣本中Fcγ的含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2760 |
英文名稱 | Fcγ ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:2.8 μg/L
檢測范圍:15μg/L~720μg/L
反應(yīng)時間:樣本孵育 88min,二抗 32min,顯色 21min,總 141min
保存條件:2~8℃冷藏,終止液常溫可長期存放
顯色系統(tǒng):OPD 底物顯色
檢測波長:492nm
標準曲線繪制:6 個梯度濃度,線性回歸擬合曲線
注意事項:血清樣本稀釋比例嚴格按照說明書,稀釋誤差會大幅影響結(jié)果
關(guān)鍵注意事項:
本試劑盒僅科研體外檢測,嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2~8℃冷鏈,嚴禁高溫暴曬。
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實驗操作流程:
預(yù)處理:試劑盒所有試劑室溫平衡 28min,稀釋洗滌液,配制 Fcγ 梯度標準溶液。
加樣上板:微孔板各孔加入標準品、待測樣本、空白對照 100μL。
酶結(jié)合物加入:每孔加入酶標記抗 Fcγ 抗體 100μL,封板密封邊緣縫隙。
恒溫結(jié)合孵育:37℃避光孵育 65min。
洗板除游離物:倒掉廢液,洗液浸泡 35s,拍干,洗板 6 次。
顯色反應(yīng):添加顯色底物,避光顯色 18min。
終止讀數(shù):加入終止液終止反應(yīng),450nm 測吸光度,繪制標準曲線定量 Fcγ。
關(guān)鍵字: 人免疫球蛋白G Fc片段;Fcγ;ELISA試劑盒;
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