?產(chǎn)品名稱:鮑球狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Abalone Spherical VirusPCR
貨號(hào):YS-P013768
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格?:50T/盒
檢測(cè)原理:
檢測(cè)采用病毒特異性保守基因設(shè)計(jì)上下游特異性引物,提取樣本中病毒核酸后,通過 Taq 酶介導(dǎo)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),靶標(biāo)基因片段指數(shù)級(jí)擴(kuò)增,結(jié)合瓊脂糖凝膠電泳觀察特異性條帶判定病毒存在。
檢測(cè)基于實(shí)時(shí)熒光定量 PCR(qPCR)原理,靶向鮑球狀病毒衣殼蛋白基因,擴(kuò)增過程中熒光探針與靶序列結(jié)合釋放熒光信號(hào),依靠熒光 Ct 值實(shí)現(xiàn)病毒定性及載量半定量檢測(cè)。
檢測(cè)雙重 PCR 分型檢測(cè)原理,同時(shí)設(shè)計(jì)兩套病毒特異性引物,區(qū)分野生型與變異株病毒核酸,依靠擴(kuò)增片段大小差異,一次性完成病毒鑒定與毒株初步分型篩查。
實(shí)驗(yàn)流程:
RNA提取:使用配套試劑或商業(yè)試劑盒提取樣品RNA。
反應(yīng)配制:按說明書比例混合預(yù)混液、引物探針、模板RNA及對(duì)照。
PCR擴(kuò)增:
預(yù)變性:95℃ 2分鐘;
循環(huán):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(40個(gè)循環(huán)),于FAM通道采集信號(hào)。
結(jié)果分析:通過Ct值判定病毒含量,陽性對(duì)照需出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線,陰性對(duì)照無信號(hào)。
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注意事項(xiàng):
試劑禁止反復(fù)凍融,分裝為小體積 - 20℃保存,融化后冰上放置不超過 2 h
所有耗材必須無 DNase/RNase,吸頭一次性使用,廢液、廢棄 PCR 管 121℃高壓滅菌后丟棄
陽性質(zhì)粒高拷貝,開蓋全程在生物安全柜操作,防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
試劑盒僅限科研檢測(cè),禁止人、臨床樣本檢測(cè)
試劑盒過期、試劑渾濁、變色禁止使用
若大量樣本出現(xiàn)陰性對(duì)照帶污染,立即更換全新試劑盒,徹底紫外消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、移液器
關(guān)鍵字: 鮑球狀病毒;PCR檢測(cè)試劑盒;
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