本試劑盒采用成熟的熒光PCR擴增原理，針對牛皰疹病毒保守核酸序列設(shè)計專屬擴增體系，可對牛各類組織、分泌物、體液樣本中的牛皰疹病毒進行快速定性檢測。試劑盒操作簡便、檢測周期短，無需復(fù)雜樣本預(yù)處理，兼具高特異性與高靈敏度，可精準檢出低載量病毒隱性感染樣本。主要應(yīng)用于牛皰疹病毒感染的臨床診斷、養(yǎng)殖源頭疫病篩查、進出口牛只檢疫及疫病流行趨勢監(jiān)測，助力規(guī)?；霾《拘砸卟〕B(tài)化防控。
產(chǎn)品名稱 | 牛皰疹病毒型PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P013933 |
英文名稱 | Bovine Hepervirus 1 (BHV1)1PCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
針對牛皰疹病毒糖蛋白 gB 保守 DNA 序列設(shè)計上下游特異性引物，常規(guī) PCR 擴增后凝膠電泳，出現(xiàn)預(yù)期大小條帶即為病毒核酸陽性。
熒光定量 Taqman 探針 PCR，擴增病毒即刻早期基因，擴增每循環(huán)釋放熒光，通過 Ct 閾值快速定量牛皰疹病毒載量。
磁珠法提純組織樣本病毒 DNA，等溫預(yù)擴增結(jié)合普通 PCR，低病毒載量樣本也可高效檢出，適配病牛臟器、分泌物多種檢測樣本。
?操作步驟?：
1. DNA提?。颖局苽鋮^(qū)）
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標準曲線制備（獨立操作區(qū)）
標記6管為梯度稀釋點（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽性對照依次稀釋，混勻后作為標準品（避免污染）。
3. PCR反應(yīng)體系配制（試劑配制區(qū)）
按以下比例配制（示例）：
| 組分 | 體積（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機檢測
程序設(shè)置：預(yù)變性95℃ 3 min；40循環(huán)（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析：根據(jù)Ct值及標準曲線計算樣本濃度。
?注意事項?：
1、實驗分區(qū)管理?
實驗全程需嚴格劃分三個獨立區(qū)域：?試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)?，各區(qū)實驗服、移液器及耗材?嚴禁混用?，防止交叉污染。
?2、防止污染操作?
使用帶濾芯槍頭，每步更換槍頭；
陽性對照操作應(yīng)在專用生物安全柜中進行，避免污染其他試劑；
加樣后立即蓋緊管蓋，避免氣溶膠擴散。
?3、試劑保存與使用?
所有試劑需?-20℃避光保存?，避免反復(fù)凍融，確保穩(wěn)定性；
使用前于冰上解凍并輕柔混勻，瞬時離心后使用。
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關(guān)鍵字： 牛皰疹病毒型;PCR檢測試劑盒;
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