?產(chǎn)品名稱：白樂杰馬杜拉放線菌PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Actinomadura pelletieriPCR
貨號(hào)：YS-P013781
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格?：50T/盒
檢測(cè)原理：
篩選白樂杰馬杜拉放線菌特有 rRNA 間隔序列，設(shè)計(jì)物種特異性引物，區(qū)分其他放線菌。
病灶組織破碎提取放線菌基因組 DNA，去除組織膠原雜質(zhì)保證擴(kuò)增效率。
熒光 PCR 全程監(jiān)測(cè)擴(kuò)增曲線，典型陽性曲線證明樣本檢出白樂杰馬杜拉放線菌。
實(shí)驗(yàn)流程：
樣本制備：
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反應(yīng)體系配制（20 μL體系示例）：
預(yù)混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特異性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
補(bǔ)充無核酸酶水至終體積。
PCR擴(kuò)增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)）；
熔解曲線分析：60~95℃（可選，用于驗(yàn)證擴(kuò)增特異性）。
結(jié)果判讀：
陽性：Ct值≤35且熔解曲線峰單一；
陰性：Ct值≥40或無擴(kuò)增曲線；
可疑：35<Ct值<40，建議復(fù)測(cè)或結(jié)合熔解曲線分析。
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注意事項(xiàng)：
所有耗材必須無核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸?。?/span>
陽性模板拷貝濃度高，開蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴(kuò)散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴(kuò)增產(chǎn)物、實(shí)驗(yàn)廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動(dòng)植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測(cè)，禁止人體臨床檢測(cè)；
移液器、操作臺(tái)定期紫外消毒，長(zhǎng)期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
關(guān)鍵字： 白樂杰馬杜拉放線菌;PCR檢測(cè)試劑盒;
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