本試劑盒為牛鼻炎病毒通用型檢測產(chǎn)品，基于保守基因序列設(shè)計通用引物探針，可覆蓋牛鼻炎病毒各主流亞型的核酸檢測，適配牛鼻腔拭子、鼻部分泌物、呼吸道黏膜組織樣本。試劑盒通用性強、覆蓋面廣，同時具備高特異性與靈敏度，可一次性篩查各類牛鼻炎病毒感染情況。適用于牛鼻炎疫病批量篩查、亞型初步鑒別、養(yǎng)殖環(huán)境疫病監(jiān)測及畜禽呼吸道病毒綜合防控工作。
產(chǎn)品名稱 | 牛鼻炎病毒通用PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P013945 |
英文名稱 | Bovine Rhinitis Virus (BRV) RTPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
設(shè)計通用保守引物靶向所有牛鼻炎病毒 3D 聚合酶基因，qRT-PCR 熒光信號廣譜檢出全部亞型牛鼻炎病毒。
通用 RT-PCR 擴增病毒 VP4 基因，電泳條帶陽性證明樣本存在任意型別牛鼻炎病毒。
熔解曲線分型 RT-PCR，擴增通用靶標(biāo)后通過不同 Tm 值區(qū)分牛鼻炎病毒各亞型。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴增（核酸擴增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時采集熒光信號，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴增。
?注意事項?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會直接導(dǎo)致無擴增條帶
陽性質(zhì)粒拷貝數(shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實驗室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實驗后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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關(guān)鍵字： 牛鼻炎病毒通用;PCR檢測試劑盒;
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