本試劑盒為牛病毒性腹瀉病毒通用型檢測試劑，靶向病毒高度保守基因片段，可覆蓋各基因型牛病毒性腹瀉病毒的核酸檢測，采用高靈敏度RT-PCR技術(shù)，適配牛血液、血清、糞便、組織樣本。可精準(zhǔn)檢出急性感染、持續(xù)性隱性感染樣本，有效解決傳統(tǒng)檢測方法漏檢問題。廣泛應(yīng)用于牛群引種檢疫、種群凈化、腹瀉疫病病因確診、規(guī)模化牛場疫病常態(tài)化防控及進出口畜禽檢測。
產(chǎn)品名稱 | 牛病毒性腹瀉病毒通用PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P013948 |
英文名稱 | Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV)RTPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
靶向病毒 5’UTR 高度保守區(qū)設(shè)計通用探針引物，一步法 RT-qPCR 廣譜檢出所有基因型牛病毒性腹瀉病毒。
通用 RT-PCR 擴增病毒非結(jié)構(gòu)蛋白基因，電泳即可篩查牛血液、精液、糞便中病毒核酸。
多重通用熒光 RT-PCR，同步區(qū)分牛病毒性腹瀉病毒與牛黏膜病相關(guān)病毒，無交叉反應(yīng)。
?操作步驟?：
樣本制備：
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反應(yīng)體系配制（20 μL體系示例）：
預(yù)混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特異性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
補充無核酸酶水至終體積。
PCR擴增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）；
熔解曲線分析：60~95℃（可選，用于驗證擴增特異性）。
結(jié)果判讀：
陽性：Ct值≤35且熔解曲線峰單一；
陰性：Ct值≥40或無擴增曲線；
可疑：35<Ct值<40，建議復(fù)測或結(jié)合熔解曲線分析。
?注意事項?：
所有耗材必須無核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸取；
陽性模板拷貝濃度高，開蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴增產(chǎn)物、實驗廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測，禁止人體臨床檢測；
移液器、操作臺定期紫外消毒，長期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
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關(guān)鍵字： 牛病毒性腹瀉病毒通用;PCR檢測試劑盒;
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