檢測(cè)原理：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗小鼠 IL-4抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)孵育，樣本中存在的IL-4與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合，形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物，避光顯色。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm波長(zhǎng)(參考校正波長(zhǎng)540nm或570nm)測(cè)定吸光度值。

檢測(cè)類(lèi)型：雙抗夾心法

形式：預(yù)包被96孔板

檢測(cè)樣本類(lèi)型：細(xì)胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗小鼠 IL-4檢測(cè)抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說(shuō)明書(shū)一份。

靈敏度：2.3 pg/mL

檢測(cè)范圍：15.6 - 1,000 pg/mL

回收率范圍：75-112%

保存方法：2-8℃

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖

背景：

白細(xì)胞介素 4（IL-4） ， 又稱(chēng)為 B 細(xì)胞刺激因子 1, 是一個(gè)約為 18-20 kDa 的單體細(xì)胞因子， 在免疫反應(yīng)中呈多向性效應(yīng)。 小鼠 IL-4 的前體有 140 個(gè)氨基酸， 包括一個(gè) 20 個(gè)氨基酸的信號(hào)肽和一個(gè) 120 氨基酸的成熟鏈。 IL-4 含有 3 個(gè) N 鏈接糖基化潛在位點(diǎn)， 3 個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵， 其結(jié)構(gòu)為一個(gè)捆綁的四α-螺旋體。 與人 IL-4 相似，小鼠 IL-4 有一個(gè)小的選擇性剪切體。 與人 IL-4 不同的是， 此剪切體被認(rèn)為表達(dá)很低，意義不大。 成熟的小鼠 IL-4 氨基酸序列與人和大鼠 IL-4 分別有 43%和 63%同源性。 研究顯示， 人、 小鼠和大鼠 IL-4 的活性均屬于種屬特異性。 IL-4 由趨向 Th2的 CD4+ T 細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、 NK T 細(xì)胞、γδT 細(xì)胞和嗜酸性細(xì)胞表達(dá)。

IL-4 在 2 型免疫反應(yīng)中起關(guān)鍵作用， 能促進(jìn) Th2 分化和 B 細(xì)胞分泌免疫球蛋白 G1和免疫球蛋白 E 亞型。 IL-4 通過(guò)結(jié)合 I 型或 II 型受體復(fù)合物引起 Th2 分化， 該復(fù)合物含有分別與γ鏈或 IL13Rα1 偶聯(lián) IL-4 受體α亞基。 通過(guò)細(xì)胞表面 IL-4 受體的異二聚體化， 激活 JAK 族蛋白絡(luò)氨酸激酶， 引起其細(xì)胞質(zhì)內(nèi) C 端磷酸化。 從而引發(fā) STAT6 的招募和磷酸化。 隨著 STAT6 的磷酸化、 構(gòu)象發(fā)生變化， 導(dǎo)致 STAT6的二聚體化、 核轉(zhuǎn)位、 與靶基因 DNA 結(jié)合和轉(zhuǎn)錄激活， 這些靶基因包括 IL-4、 IL-5、IL-13 以及 Th2 特異性因子 GATA3 和 c-Maf 等。在功能上， IL-4 促進(jìn)小鼠 B 細(xì)胞增殖、 生存和免疫球蛋白類(lèi)轉(zhuǎn)換為 IgG1和 IgE， 促進(jìn)肥大細(xì)胞、 嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的啟動(dòng)和趨化， 促進(jìn)幼稚 CD4+ 細(xì)胞獲得Th2 表型， 以及促進(jìn)上皮細(xì)胞的增殖和活化。 在腫瘤免疫學(xué)方面， IL-4 也是一個(gè)重要細(xì)胞因子。 在早期小鼠實(shí)驗(yàn)中， 研究人員發(fā)現(xiàn) IL-4 具有強(qiáng)大的抗腫瘤能力。 小鼠排斥表達(dá) IL-4 的腫瘤， 形成長(zhǎng)期的抗腫瘤免疫。 這可能是由于 IL-4 具有抗血管生成作用或激活、 選擇 CD8+ T 細(xì)胞的能力。 不可理喻的是， 新的證據(jù)顯示 IL-4是一個(gè)促腫瘤分子， 因此 IL-4 是一個(gè)具有反向作用的細(xì)胞因子。 可能的解釋是，IL-4 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞中的抵抗凋亡分子上調(diào)， 和 CD8+ T 細(xì)胞中的溶細(xì)胞分子下調(diào)。 另外，腫瘤產(chǎn)生的 IL-4 也被認(rèn)為可作用于局部腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs） ， 從而誘導(dǎo)促進(jìn)細(xì)胞遷移的組織蛋白酶的分泌。