p3xFlag-CMV-14表達載體是一個6.3 kb的載體,從pCMV5載體衍生而來,用于在哺乳動物細胞內(nèi)瞬表達或穩(wěn)表達C末端帶有3xFlag標(biāo)簽的融合蛋白。載體多克隆位點下游片段編碼了三個相鄰Flag抗原表位(Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp)。這使得能夠使用Flag M2抗體檢測蛋白表達情況。
載體上的人類巨細胞病毒(cytomegalovirus)啟動子調(diào)控區(qū)域促進了Flag融合蛋白基因的轉(zhuǎn)錄.氨基糖苷類磷酸轉(zhuǎn)移酶基因(Neo)使得載體具有耐氨基糖苷類例如為G418的能力,允許篩選轉(zhuǎn)染成功的細胞株。
pP3XFLAG-CMV-14表達載體是大腸桿菌和哺乳動物細胞的穿梭載體。當(dāng)使用SV40 T抗原表達的宿主細胞系,如COS細胞,復(fù)制和基因組整合效率能夠達到狀態(tài)。
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