"HK-2 [Human kidney] Cell:人腎小管上皮細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:該細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞,通過導入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉(zhuǎn)染外生包裝細胞Psi-2,Psi-2細胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317,最后將PA317產(chǎn)生的病毒顆粒導入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418篩選轉(zhuǎn)導克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細胞來源于單克隆。PCR檢測證實HK-2細胞基因組中含有E6/E7基因。 Hs737T細胞系相關產(chǎn)品:KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞 Strain V細胞系相關產(chǎn)品:NeHepLxHT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、SUDHL6細胞 P3-X63-Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品:H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞 H-87細胞系相關產(chǎn)品:Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 HK-2 [Human kidney] Cell:人腎小管上皮細胞系 細胞培養(yǎng)相關問題總結(jié):冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管之爆裂;細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活;培養(yǎng)細胞時應使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養(yǎng)時應使用10%CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應使用5%CO2培養(yǎng)細胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應添加任何抗生素。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:4傳代;2-3天換液1次 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Wayne State University-Head and Neck 13細胞系相關產(chǎn)品:NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞 QGY7701細胞系相關產(chǎn)品:U343細胞、CX1細胞、AM細胞 SuDHL 2細胞系相關產(chǎn)品:DH 82細胞、Ly7細胞、H378細胞 118MG細胞系相關產(chǎn)品:SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞 LM TK negative細胞系相關產(chǎn)品:SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞 細胞生長特性:貼壁生長 HK-2 [Human kidney] Cell:人腎小管上皮細胞系 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 細胞形態(tài)特性:上皮樣 NCI-H1341細胞系相關產(chǎn)品:SNU-407細胞、Case 3細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞 H2085細胞系相關產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞 NCI-SNU-601細胞系相關產(chǎn)品:U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞 BC-027細胞系相關產(chǎn)品:MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞 RIN Cl-5F細胞系相關產(chǎn)品:SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞 SK-RC 39細胞系相關產(chǎn)品:TE-15細胞、HT1080細胞、NCI.H23細胞 MDA-MB 361細胞系相關產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞 HK-2 [Human kidney] Cell:人腎小管上皮細胞系 DAN-G細胞系相關產(chǎn)品:aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞 ECV 304細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL24細胞、NCI-H596細胞、THLE-2細胞 P30OHK細胞系相關產(chǎn)品:Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞 HSAS4細胞系相關產(chǎn)品:A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞 Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關產(chǎn)品:NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞 R D細胞系相關產(chǎn)品:CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞 HEH2細胞系相關產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞 INS-1E細胞系相關產(chǎn)品:AA-Mel細胞、Ramos (RA)細胞、PL-45細胞 G361細胞系相關產(chǎn)品:EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞 G361細胞系相關產(chǎn)品:EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞 MLOY4細胞系相關產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞 Tn-5細胞系相關產(chǎn)品:MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞 H-676B細胞系相關產(chǎn)品:MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞 KU 19-19細胞系相關產(chǎn)品:Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞 L-M (TK-)細胞系相關產(chǎn)品:Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞 A2780/Taxol細胞系相關產(chǎn)品:RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞 Rat 1細胞系相關產(chǎn)品:HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞 Hs-578Bst細胞系相關產(chǎn)品:MN 60細胞、P3-Jiyoye細胞、UMR-106細胞 Porcine Kidney-13細胞系相關產(chǎn)品:H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞 HuLEC-5a細胞系相關產(chǎn)品:AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞 alpha TC1.6細胞系相關產(chǎn)品:HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞 NHRF細胞系相關產(chǎn)品:D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞 HO1-N-1細胞系相關產(chǎn)品:143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞 SCC90細胞系相關產(chǎn)品:COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞 MLA 144細胞系相關產(chǎn)品:ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞 BLO-11細胞系相關產(chǎn)品:3T3-Swiss細胞、MCF 7B細胞、16HBE細胞 COR-L26細胞系相關產(chǎn)品:EJ 138細胞、Psi2 DAP細胞、JB-6細胞 231-luc細胞系相關產(chǎn)品:BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞 HCC0202細胞系相關產(chǎn)品:B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞 MHH-CALL-2細胞系相關產(chǎn)品:HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞 Hs 578Bst細胞系相關產(chǎn)品:HCC1171細胞、Tu686細胞、J82細胞 RGCs細胞系相關產(chǎn)品:SK-MES-1細胞、C81-61細胞、3T6 Swiss Albino細胞 Hs888Lu細胞系相關產(chǎn)品:COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞 SNU-878細胞系相關產(chǎn)品:HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞 SUDHL10細胞系相關產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞 NHDF細胞系相關產(chǎn)品:CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞 LTEPsm細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞 Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關產(chǎn)品:OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞 SK-LU-1細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly 3細胞、LN 382細胞、211H細胞 Mouse podocyte細胞系相關產(chǎn)品:PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞 10T1/2細胞系相關產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞 293細胞系相關產(chǎn)品:NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞 MA 104細胞系相關產(chǎn)品:IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞 HK-2 [Human kidney] Cell:人腎小管上皮細胞系 SNUC1細胞系相關產(chǎn)品:HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞 SuDHL 4細胞系相關產(chǎn)品:Evsa T細胞、H-1876細胞、WTRL1細胞 SUIT2細胞系相關產(chǎn)品:rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞 Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關產(chǎn)品:HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞 KYSE 450細胞系相關產(chǎn)品:Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞 H441細胞系相關產(chǎn)品:HHL5細胞、H748細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞 H1703細胞系相關產(chǎn)品:DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞 OCLY8細胞系相關產(chǎn)品:PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞 HEL細胞系相關產(chǎn)品:OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞 U 266細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞 Panc 4.03細胞系相關產(chǎn)品:WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞 CMT 167細胞系相關產(chǎn)品:LLC-PK(1)細胞、766T細胞、SNU423細胞 "
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