"HK-2 [Human kidney]細(xì)胞：人腎小管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞屬源于正常腎的近曲小管細(xì)胞，通過(guò)導(dǎo)入HPV-１６ E６/E７基因而獲得永生化。將含有HPV-１６ E６/E７基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN １６ E６/E７轉(zhuǎn)染外生包裝細(xì)胞Psi-２，Psi-２細(xì)胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細(xì)胞系PA３１７，最后將PA３１７產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細(xì)胞。盡管pLXSN １６ E６/E７中含有新霉素抗性，但未用G４１８篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。Southern和FISH分析顯示HK-２細(xì)胞來(lái)源于單克隆。PCR檢測(cè)證實(shí)HK-２細(xì)胞基因組中含有E６/E７基因。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：４傳代；２-３天換液１次
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，并開(kāi)啟超凈臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10min左右再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi)；實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái)，以利于氣流的流通。實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。操作時(shí)小心取用無(wú)菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開(kāi)的容器瓶口正上方操作，容器打開(kāi)后，傾斜45°操作，操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1-2個(gè)月對(duì)培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤(pán)2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤(pán)內(nèi)加入無(wú)菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。定期清洗或更換超凈臺(tái)過(guò)濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖，凋亡，遷移，分化之類(lèi)的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤(rùn)洗的方法消化的話(huà)(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對(duì)細(xì)胞代數(shù)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤(rùn)洗，都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過(guò)影響ECM相關(guān)酶的活性，來(lái)使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過(guò)螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間(如果１０min還消化不徹底的話(huà))，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見(jiàn)的操作，因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問(wèn)可以講，對(duì)于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。
FAO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174 T細(xì)胞、CORL23細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞
SBC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-LM細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF295細(xì)胞、HKBML細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞
SW 837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2122細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞
SK-MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細(xì)胞、OSC19細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞
BCPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞
Natural Killer-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL15細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞、H-865細(xì)胞
COLO 320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-2細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞
UPCISCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC133細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞、138 MG細(xì)胞
MS751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞
NCI-H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1668細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞
MLMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞
SJ-Rh 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC PK1細(xì)胞、H716細(xì)胞、RKN細(xì)胞
L-WRN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞、CW-2細(xì)胞
LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1500細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞、H-35細(xì)胞
SW962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞
SW962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZ細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞、NF639細(xì)胞
U87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞
HS-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞
NCI-H209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA.1細(xì)胞、H1693細(xì)胞、KBM-7細(xì)胞
B-CPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2C細(xì)胞、SW 527細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞
FRTL-5 Cl 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8.653細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞
AR-42J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC4細(xì)胞、RAEC細(xì)胞、RCC_7860細(xì)胞
H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞
J-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293EBNA細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞
EB-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞
SKMES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG63細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞、SW-982細(xì)胞
JEG-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295R細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞
SW 1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC202細(xì)胞、H-345細(xì)胞、GT38細(xì)胞
Evsa-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細(xì)胞、C42細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞
B16F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-FT細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞、MLA144細(xì)胞
SUDHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞
HLCL9B10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1599細(xì)胞、8402細(xì)胞、BSC40細(xì)胞
NCI-H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞
COR-L23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF Pac1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞
D-324MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8402細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞、C 643細(xì)胞
QSG7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT-1細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞
GS9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞、RGE細(xì)胞
WERIRb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 15 HL-60細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞、Ly18細(xì)胞
2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞
H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBdSMC細(xì)胞、IM95細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞
M109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞
WI38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH748細(xì)胞、WC00059細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞
LA4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA-1細(xì)胞、NS1細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞
NS-20Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF CEM細(xì)胞、VK2細(xì)胞、U2932細(xì)胞
NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞
BT549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-A細(xì)胞、U343MG細(xì)胞、DMS79細(xì)胞
SUIT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1735細(xì)胞、GalK 1細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞
SK-N-BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB157細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞、J-111細(xì)胞
PL9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞
U266-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞
Caki-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA-87細(xì)胞、NCIH929細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞
SW948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-5細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞
H35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞、RN細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞
mRMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375mel細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞
AML193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞
LNT-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1435細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞、C-33A細(xì)胞
AR42J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L88細(xì)胞、TI-73細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞
Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
AN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞
MXI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earles's cells細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞
SK-BR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS11細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞
HuO9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1990細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞
HLEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF295細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞
Detroit-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 513細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞
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