AO-EB雙染色試劑盒

中文名稱：AO-EB雙染色試劑盒

英文名稱：Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit

產(chǎn)品規(guī)格：50ml*2|250ml*2

吖啶橙能透過胞膜完整的細胞，嵌入細胞核DNA，與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出綠色熒光，溴化乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細胞，嵌入核DNA，發(fā)橘紅色熒光。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察，可見四種細胞形態(tài)：活細胞(VN)，核染色質(zhì)著綠色并呈正常結(jié)構(gòu)；早期凋亡細胞(VA)，核染色質(zhì)著綠色呈固縮狀或圓珠狀；晚期凋亡細胞(NVA)，核染色質(zhì)為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀；非凋亡的死亡細胞(NVN)，核染色質(zhì)著橘紅色并呈正常結(jié)構(gòu)。本產(chǎn)品AO、EB 溶液濃度分別為100ug/ml，所含穩(wěn)定劑不影響實驗效果。

使用方法：（僅供參考）
1、使用前先根據(jù)用量，將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，現(xiàn)用現(xiàn)配。
2.1、對于貼壁細胞或爬片，去掉培養(yǎng)基，用 PBS 洗兩遍去除殘余培養(yǎng)基和未貼壁細胞，加入新的 PBS；如果需要觀察全部細胞特性，保留未貼壁細胞，可以直接在培養(yǎng)基中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后，用 PBS 洗 2 次，除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養(yǎng)基于熒光顯微鏡下觀察即可。
2.2、對于懸浮細胞，可直接加入工作液或離心收集細胞后在 PBS 中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后，離心去除工作液，后用 PBS 洗 2 次，除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養(yǎng)基于熒光顯微鏡下觀察即可。
3、建議用藍光激發(fā)，視野下可以觀察到死細胞呈現(xiàn)紅色，活細胞呈現(xiàn)綠色。

注意事項：
1、含酚紅培養(yǎng)基對觀察有輕微影響。建議使用無酚紅培養(yǎng)基。
2、染色液工作濃度和染色時間可根據(jù)具體實驗情況適當調(diào)整，以期達到效果。

保存：4℃避光密封保存，有效期一年。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！