9054-89-1
中文名稱
超氧化物歧化酶
英文名稱
Superoxide dismutase
CAS
9054-89-1
分子式
NULL
更新日期
2026/05/29 17:26:05
基本信息
中文別名
酵素超氧化物
超氧歧化
奧古蛋白
超氧歧化酶
超氧物歧化酶
過氧化物岐化酶
SOD酶(豬)
過氧化物歧化酶
超氧化物歧化酶
英文別名
SODSOD1
SOD-3
hrSOD
EC-SOD
rh-SOD1
Cuprein
ORGOTEIN
Ontosein
Ormetein
所屬類別
生物：重組蛋白物理化學性質
外觀性狀超氧化物歧化酶的主要作用是能專一清除體內的超氧陰離子O-2,以解除氧陰離子氧化體內的成分造成對機體的損害。
其半衰期短，通常僅有6～10min。相對分子質量大，不易透過細胞膜、口服易受蛋白不解酶作用而失活。所以臨床應用受到限制。該酶系一種酸性蛋白質，較穩(wěn)定，能耐熱。Ph7.6～9時穩(wěn)定，ph6以下和12h以上不穩(wěn)定。特別是在ph2以下極度不穩(wěn)定。具有較強的抗胃蛋白酶和胰蛋白酶水解的能力。
無免疫調節(jié)及鎮(zhèn)痛作用，也不影響前列腺素等炎癥介質的合成。
其半衰期短，通常僅有6～10min。相對分子質量大，不易透過細胞膜、口服易受蛋白不解酶作用而失活。所以臨床應用受到限制。該酶系一種酸性蛋白質，較穩(wěn)定，能耐熱。Ph7.6～9時穩(wěn)定，ph6以下和12h以上不穩(wěn)定。特別是在ph2以下極度不穩(wěn)定。具有較強的抗胃蛋白酶和胰蛋白酶水解的能力。
無免疫調節(jié)及鎮(zhèn)痛作用，也不影響前列腺素等炎癥介質的合成。
儲存條件2-8°C
溶解度在含有 0.1 mM EDTA 的 0.05 M 磷酸鉀緩沖液，pH 7.8 中易溶解，濃度為 5 mg/mL。
形態(tài)powder
顏色blue-gray
PH值7.8
生物來源human erythrocytes
水溶解性water: 20mg/mL
aqueous buffer, pH 7.5: soluble
aqueous buffer, pH 7.5: soluble
Specific Activity2,000-6,000units/mg protein (biuret)
化妝品成分功效SKIN CONDITIONING
REDUCING
ANTIOXIDANT
REDUCING
ANTIOXIDANT
安全數(shù)據(jù)
警示詞警告
危險性描述H315-H319-H335
防范說明P261-P280-P271
危險品標志B
危險類別碼36/37/38
WGK Germany3
海關編碼35079090
存儲類別10 - Combustible liquids
危險性類別Resp. Sens. 1
應用領域
用途1
用于生化研究，臨床上常用作治療全身性紅斑狼瘡、皮肌炎、類風濕性關節(jié)炎、硬皮病、自身免疫性溶血性貧血、血小板減少癥等自身免疫性疾病，治療某些心血管疾病，用于防衰老。用途2
超氧化物歧化酶制劑臨床主要用于治療全身性紅斑狼瘡、皮膚炎、硬皮病、類風濕性關節(jié)炎、自身免疫性溶血性貧血、血小板減少等自身免疫性疾病，治療心肌缺血與缺血再灌注綜合征。也可用于斷肢再植、整形、美容及腎、肝、心臟等器官的保護和移植等手術過程。但糖尿病、肝炎、尿毒癥患者忌用。不能與酸性或堿性藥物，含醇制劑、金屬鹽和抗生素類藥物配伍。肌注，一次8mg,每周2～4次；關節(jié)腔內注射，一次4mg，每2周1次；放射性后遺癥，深部肌注，一次4mg，放療后半小時注射。
制備方法
方法1
以牛紅血球為原料，洗滌后分離去除血紅蛋白，再經(jīng)柱層析、透析精制得產(chǎn)品。方法2
收集、乳洗取新鮮豬血，離心，除去黃色血漿，紅細胞用氯化鈉溶液（9g/L即0.9%）離心洗浮，除去洗浮液，反復清洗3次，得干凈紅細胞。新鮮豬血離心除血漿→收集紅血球NaCl洗3次→洗浮干凈紅血球
溶血、去血紅蛋白在溫度50C下，于干凈紅細胞中加入去離子水，攪拌30min，然后在每100ml紅細胞溶液中加入25ml乙醇（95%）和15ml氯仿，攪拌15min，離心去血紅蛋白，收集上清液。
干凈紅血球去離子水；50;30min→溶血}溶血物
乙醇；氯仿→去血紅蛋白上清液
沉淀、熱處理在00C左右，于上清液中加入1.2～1.5倍體積的丙酮，待大量絮狀沉淀產(chǎn)生后，離心，除去上清液，得沉淀物。沉淀物加適量去離子水使其溶解，離心，除去不溶性蛋白，上清液在55～650C熱處理10～15min,離心，除去大量熱變性蛋白，收集黃綠色的上清液。
上清液丙酮；00→沉淀沉淀去離子水;600→熱處理黃綠色澄清液
沉淀、去不溶蛋白、透析在00C將加入適量丙酮于上清液中，使其產(chǎn)生大量絮狀沉淀，離心，除去上清液，收集沉淀，加去離子水充分攪拌使其溶解，離心除去不溶性蛋白，清液置透析袋中動態(tài)透析6～8h，得透析液。
黃綠色澄清液丙酮；去離子水;00→沉淀；去不溶蛋白；透析透析液
吸附、洗脫、濃縮、凍干將透析液加到已用ph7.6磷酸緩沖液(2.5mmol/L)平衡好的DEAE-Sephadex A-50色譜柱上吸附，用ph7.6的磷酸鉀緩沖液（2.5～50mmol/L）進行梯度洗脫，收集肯有超氧化物歧化酶活力的洗脫液，超濾，濃縮，冷凍干燥，即是超氧化物歧化酶成品
透析液DEAE-Sephadex A-50;磷酸鉀緩沖液；Ph7.6→^吸附、洗脫、超濾；濃縮、凍干成品
電泳鑒定條件用瓊脂糖凝膠（5g/L即0.5g）平板電泳，用ph8.4三羥甲基氨基甲烷-甘氨酸為緩沖液，電壓梯度22V/cm，電流3mA/cm，電泳時間35min，固定染色液5g/L（0.5%）氨基黑10B，脫色液為7g/L(7%)乙酸。
常見問題列表
概述
SOD（超氧化物歧化酶）SOD是一系列酶的總稱，是一種源于生命體的活性物質，能消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的有害物質。能夠有效遏制自由基，俘獲自由基，分解自由基，力度大，靶向準，是唯一以自由基為底物的清除酶。
生物化學性質
超氧化物歧化酶能夠清除超氧化物，保護細胞免受氧化損傷。超氧化物與非自由基的反應是自旋禁阻的。在生物學系統(tǒng)中，這就意味著它主要是與自身（歧化）或另一個生物學自由基（如一氧化氮）反應。超氧化物陰離子自由基（O2?）能夠較快地（在pH=7時，反應速度為~105 M?1 s?1）歧化為O2和過氧化氫（H2O2）。但超氧化物能夠與特定的分子（如NO自由基）以更快的速度反應，生成過氧亞硝酸根離子（O=N-O-O?），因此超氧化物歧化酶的催化作用就顯得尤為重要。而且，超氧化物的歧化反應與其初始濃度的平方相關，因此雖然高濃度的超氧化物半衰期很短（比如0.1mM濃度下為0.05秒），但低濃度的超氧化物的半衰期相當長（0.1nM濃度下可達14小時）。
對人體作用
超氧化物歧化酶有強大的抗炎作用，臨床用于類風濕關節(jié)炎、骨關節(jié)病、放射性膀胱炎，可以清除體內過量的自由基，提高人體免疫力，延緩衰老；抗疲勞，調節(jié)女性生理周期，推遲更年期。
操作步驟
1. 標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL。 2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 3. 加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。 4. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。 5. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。 6. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。 7. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。 8. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。 9. 測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。檢測原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人超氧化物歧化酶3(SOD3) 水平。用純化的超氧化物歧化酶3(SOD3) 捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入超氧化物歧化酶3(SOD3) ，再與HRP標記的檢測抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的超氧化物歧化酶3(SOD3) 呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中超氧化物歧化酶3(SOD3) 含量。樣本
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。 2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。 3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。 5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。 6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。 7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。用途
本試劑盒用于測定人血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中超氧化物歧化酶3(SOD3) 的含量。