概述[1]
格里西輪是一種PPAR配體劑，可以此為有效成分，用于改善胰島素抗性或改善胰島素抗性綜合征。PPARγ配體具有改善胰島素抗性，預防和/或改善以2型糖尿病為首的、高胰島素血癥、脂肪代謝異常、肥胖(特別是內臟脂肪型肥胖)、高血壓、動脈硬化性疾病等胰島素抗性綜合征有效。化合物專利CN02824015.4首次報道了該化合物。
制備[1]
將1.2kg甘草(G.ウラレンシス：東北甘草)的微粉碎品浸到5.5L醋酸乙酯中，室溫、避光抽提7天后，通過過濾獲得抽提液。對其抽提液進行減壓濃縮除去溶劑，獲得74.0g提取物。將提取物加到硅膠色譜柱上(1500ml)，用氯仿∶甲醇＝19∶1(v/v)進行洗脫，得到級分。對洗脫級分進行減壓濃縮除 去溶劑，獲得55.4g粗級分。通過反復進行硅膠柱色譜、ODS硅膠柱色譜、裝了ODS柱的高效液相色譜、凝膠過濾色譜、分相薄層色譜，對所得粗級分進行純化，得到格里西輪(80.7mg)。
藥理活性[1]
將CV-1細胞(來源于雄性非洲綠猴腎臟的培養(yǎng)細胞)接種到96孔培養(yǎng)板中，6×103細胞/孔，37℃、5％CO2條件下培養(yǎng)24小時。應用含10％FBS(胎牛血清)、10ml/L青霉素-鏈霉素溶液(分別為5000IU/ml，5000ug/ml，GIBCO)、37mg/L抗壞血酸(和光純藥工業(yè)株式會社)的DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium，GIBCO)培養(yǎng)基。用OPTI-MEM(GIBCO)洗滌細胞后，用lipofectamine plus(GIBCO)轉化pM-mPPARγ和4×UASg-luc。pM-mPPAR γ是表達結合了酵母來源的轉錄因子GAL4基因(氨基酸序列1-147)和小鼠 PPARγ配體結合部位基因(氨基酸序列174-475)的嵌合蛋白用的質粒。4×UASg-luc是將GAL4的應答序列(UASg)4次插入到熒光素酶基因上游的報告質粒。轉染大約24小時后，換成含樣品的培養(yǎng)基，培養(yǎng)24小時(n＝4)。將溶解到二甲基亞砜(DMSO)的樣品，無處置對照用DMSO，以1/1000量添 加到培養(yǎng)基中。
用含Ca，Mg的磷酸緩沖生理鹽水(PBS+)洗滌細胞后，添加ルツクライト(Packard)，用Topcount-microplate scintillation/luminescene counter(Packard)測定熒光素酶的熒光強度。對照組應用pM(去除了PPARγ配體結合部位基因的質粒)代替 pM-mPPARγ進行與測定組同樣地測定。計算出測定組及對照組的熒光強度的均值(n＝4)的比值(測定組/對照組)，將對無處置對照的比活性作為樣品的 PPARγ配體活性。測定化合物2（格里西輪）的PPARγ配體活性的結果如下：
主要參考資料
[1] [中國發(fā)明] CN02824015.4 過氧化物酶體增殖劑應答性受體配體劑及其制備方法