背景及概述[1-2]
軟骨由軟骨組織及其周圍的軟骨膜組成。軟骨膜為致密的結締組織，對軟骨有保護和營養(yǎng)作用。軟骨組織由軟骨細胞、纖維和基質構成?；|呈均質固態(tài)，主要由水和軟骨粘蛋白組成。甲苯胺藍(ToluidineBlueO)是一種常用的人工合成染料，屬于醌亞胺染料類。這類染料主要含有胺基和醌型苯環(huán)兩個發(fā)色團，從而成色原顯色。甲苯胺藍中的陽離子有染色作用，組織細胞的酸性物質與其中的陽離子相結合而被染色。甲苯胺藍不僅含有兩個發(fā)色團，還含有兩個助色團，能促使染料產生電離成鹽類，幫助發(fā)色團對組織產生染色力，使切片上的組織細胞著色，可染細胞核使之呈藍色；肥大細胞胞質內含有肝素和組織胺等異色性物質遇到甲苯胺藍可呈異染性紫紅色。軟骨染色液(甲苯胺藍法)呈強堿性，更利于組織細胞的著色。
操作步驟[1]
- 常規(guī)脫鈣，包埋、固定。
- 石蠟切片入二甲苯2次。
- 系列乙醇各1min自來水洗。
- 入軟骨染色液(甲苯胺藍法)浸染。根據(jù)不同組織，染色時間不完全相同。
- 自來水洗2min，濾紙吸干水分。
- 丙酮分化至軟骨細胞呈藍紫色清楚可見。
- 逐級乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。
結果：軟骨、成骨細胞呈紫紅色；背景呈淡藍色。
注意：軟骨染色液(甲苯胺藍法)針對較難著色組織的染色，侵染的時間相對延長。
主要參考資料
[1] 中國骨傷科學辭典
[2] 軟骨染色液(甲苯胺藍法)操作說明