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腺嘌呤的制備方法

2020/6/15 10:18:05

背景及概述[1]

腺嘌呤是一種有機(jī)堿,化學(xué)成分為6-氨基嘌呤。腺嘌呤與鳥(niǎo)嘌呤一起構(gòu)成核酸中的兩種主要嘌呤堿,與核糖或脫氧核糖通過(guò)糖苷鍵結(jié)合形成腺苷或脫氧腺苷;其三磷酸的化合物分別是腺苷二磷酸和脫氧腺苷三磷酸,是核糖核酸和脫氧核糖核酸生物合成過(guò)程中腺嘌呤的前體。此外,環(huán)腺苷酸及許多輔酶中都含有腺嘌呤,因而它在細(xì)胞代謝及能量交換中起著重要作用。

制備[2-4]

報(bào)道一、

先將計(jì)量好的110重量份的醋酐加入干燥的反應(yīng)釜中,同時(shí)開(kāi)啟攪拌,緩慢投入38重量份的腺苷,用夾套加熱至110℃,利用夾套余溫使腺苷溶解,溶清后,加入2.5重量份的硼酸,在110℃保溫反應(yīng), 1.5小時(shí)后反應(yīng)液逐漸渾濁,繼續(xù)110℃保溫反應(yīng)10小時(shí)后降溫過(guò)夜;(2)將上述反應(yīng)液抽濾分離,濾餅即為乙酰腺嘌呤,烘干后備用;(3)步驟(2)中的母液通過(guò)負(fù)壓濃縮醋酸與醋酐混合液至干,得到的糖漿,在預(yù)先準(zhǔn)備好的反應(yīng)釜中加入計(jì)量好的100重量份水后將糖漿抽入釜內(nèi),用水洗滌、降溫至20℃結(jié)晶,過(guò)濾后得到粗品四乙酰核糖;(4)步驟3中的粗品四乙酰核糖通過(guò)100重量份的工業(yè)甲醇溶解,用1重量份的活性炭脫色,過(guò)濾后冷卻結(jié)晶過(guò)夜;(5)將結(jié)晶好的四乙酰核糖通過(guò)離心分離得到四乙酰核糖濕品,將四乙酰核糖濕品投入雙錐干燥機(jī)在70℃下烘干,烘干后包裝的到四乙酰核糖;(6)將計(jì)量好的300重量份的水抽入反應(yīng)釜中,開(kāi)啟攪拌,加入15重量份的氫氧化鈉,投完后,緩慢將計(jì)量好的在步驟(2)中得到乙酰腺嘌呤投入反應(yīng)釜,投料結(jié)束后升溫至60℃,待乙酰腺嘌呤全部溶解后加入1重量份活性炭,繼續(xù)60℃保溫脫色1小時(shí),過(guò)濾分離活性炭;(7)過(guò)濾完畢后,母液繼續(xù)升溫至90℃保溫堿解2小時(shí)后降溫至40℃,開(kāi)始用8重量份的鹽酸中和至中性,析出腺嘌呤;(8)中和結(jié)束后,降溫過(guò)夜;離心得到腺嘌呤濕品;(9)腺嘌呤濕品在110℃下烘干后即完成制備。

報(bào)道二、

將腺嘌呤的種子接種到如下培養(yǎng)基中,葡萄糖15g/L,玉米漿100g/L,黃豆粉10g/L,酵母粉5g/L,植物多肽粉10g/L,豆粕粉25g/L,尿素1g/L,甘氨酸5g/L,丙氨酸2g/L,硫酸亞鐵1.5g/L,硫酸鎂0.5g/L,磷酸二氫鉀5g/L,磷酸氫二銨8g/L,氯化鈣2g/L,谷氨酸鈉10g/L,蛋氨酸1.5g/L,組氨酸0.5g/L,消泡劑0.4ml/L,培養(yǎng)溫度34℃,空氣流量0.3-0.8VVM,發(fā)酵周期45小時(shí),檢測(cè)腺嘌呤含量12.5g/L。

報(bào)道三、

一種新型合成腺嘌呤的方法,包括如下步驟:

(1)首先把乙酰次黃嘌呤分散于1,2- 二氯乙烷中,然后加入到反應(yīng)釜,緩慢投入無(wú)水 吡啶和三乙胺,攪拌升溫至110℃-120℃,加入三氯氧磷保溫反應(yīng)50-80分鐘,繼續(xù)110℃- 120℃保溫反應(yīng)4-6小時(shí)后降溫至15℃左右,靜至過(guò)夜;

(2)將上述反應(yīng)液過(guò)濾,再加入氨水/ 甲醇混合液中,進(jìn)行氨解,烘干得到腺嘌呤粗品;

(3)將得到的腺嘌呤粗品投入反應(yīng)釜,投料結(jié)束后升溫至80℃使之溶清,待腺嘌呤全部 溶解后加入活性炭進(jìn)行脫色,繼續(xù)80℃保溫脫色2小時(shí),過(guò)濾分離活性炭;

(4)過(guò)濾完畢后,進(jìn)行氨解,結(jié)晶,抽濾,用少量蒸餾水洗滌,烘干,即得腺嘌呤純品。

參考文獻(xiàn)

[1] 衛(wèi)生學(xué)大辭典

[2] [中國(guó)發(fā)明] CN201410189028.4 一種腺嘌呤合成工藝

[3] [中國(guó)發(fā)明] CN201910405324.6 一種發(fā)酵生產(chǎn)腺嘌呤的方法

[4] [中國(guó)發(fā)明] CN201710934705.4 一種新型合成腺嘌呤的方法

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