背景及概述^[1]

國產(chǎn)貝母屬植物約有43種、19變種，主要分布于四川、新疆、甘肅、湖北、安徽、浙江等省。貝母在我國有悠久的應(yīng)用歷史，在長期應(yīng)用實踐中，已形成6個大的主要產(chǎn)區(qū)，即道地產(chǎn)區(qū)：伊貝母（新疆貝母）、平貝母、川貝母、湖北貝母、浙貝母及皖貝母。清代《本草綱目拾遺》中按照功效明確將貝母分為川貝母和浙貝母；臨床用藥也將貝母分為“浙貝”和“川貝”兩大類群。“川貝”以川貝母為主，2005年版《中國藥典》收載的川貝母為百合科植物：川貝母Fritillaria.cirrhosaD.Don、暗紫貝母F.unibracteataHsiaoetK.C.Hsia、甘肅貝母F.przewalskiiMaxim.或梭砂貝母F.delavayiFranch.的干燥鱗莖，具有清熱潤肺止咳的功效，用于肺熱燥咳、干咳少痰、陰虛勞嗽、咯痰帶血。

化學成分^[2]

川貝母具有悠久的使用歷史，我國自1955年以來開始對生物堿的研究中，目前已發(fā)現(xiàn)川貝母中主要有效成分為異甾體生物堿與甾體生物堿，川貝母中已經(jīng)分離并確定結(jié)構(gòu)的生物堿成分有100余個化合物，其中異甾體生物堿所占比例最多，大約為75%，其次為膽甾衍生物。異甾衍生物可以分為西藜蘆堿類和介藜蘆堿類，而膽甾衍生物又可分為白藜蘆堿類和茄次堿類。除生物堿外，川貝母中還含有大量非生物堿成分，非生物堿主要含有皂苷、萜類、甾體、脂肪酸、嘌呤、嘧啶、烯烴類化合物、醇類化合物、呋喃類化合物、酮類化合物、烷烴類化合物和無機元素Ca、Mg、K、Fe、Co、Ni、Mn、Ba、Ti、Al、Sn、Cr、Sr等。隨著川貝母品種的不同，生物堿和非生物堿的種類與含量均有較大差異，隨著生長周期的不同，各品種川貝母生物堿和非生物堿的種類與含量也會發(fā)生變化。

川貝母（卷葉貝母）FritillariacirrhosaD.Don

根據(jù)文獻，川貝母中已經(jīng)分離并確定結(jié)構(gòu)的化合物主要有西貝堿、貝母辛、貝母素甲、貝母素乙、云貝酮、異梭砂貝母堿、垂茄次堿、5α-25α-solanidine-3β-ol、川貝堿、川貝酮堿、胸苷、腺苷、β-谷甾醇、E-肉桂酸、單棕櫚酸甘油酯、胡蘿卜苷、尿嘧啶、胸嘧啶、尿苷、胞苷、肌苷、鳥苷以及多種微量元素等。

暗紫貝母FritillariaunibracteataHsiaoetK.C.Hsia

暗紫貝母中已經(jīng)分離并確定結(jié)構(gòu)的化合物主要有貝母素甲、貝母素乙、西貝堿、貝母辛、松貝辛、川貝酮、代拉文酮、松貝甲素、松貝乙素、蔗糖、硬脂酸、軟脂酸、β-谷甾醇、甲酸丁酯、乙酸丁酯、葵二烯-2，4-醛、十四烷酸、十六烷酸、二十二烷、campesterol蕓苔甾醇等化合物以及多種微量元素。

瓦布貝母FritillariaunibracteataHsiaoetK.C．

瓦布貝母中已經(jīng)分離并確定結(jié)構(gòu)的化合物主要有西貝素、貝母辛、鄂貝乙素、異浙貝甲素、西貝素氮氧化物、C-去甲-D-高甾生物堿，首次從瓦布貝母鱗莖中分離得到異浙貝甲素氮氧化物。

梭砂貝母FritillariadelavayiFranch.

梭砂貝母中已經(jīng)分離并確定結(jié)構(gòu)的化合物主要有梭砂貝母堿、梭砂貝母酮堿、川貝酮堿、梭砂貝母芬堿、梭砂貝母芬酮堿、西貝堿、川貝堿、爐貝堿、新貝甲素、代拉文、貝母辛、瓊貝酮、代拉文酮、代拉夫林、川貝酮、貝母素甲、貝母素乙、E-3，4，5-三甲氧基肉桂酸、E-對-甲氧基肉桂酸、E-肉桂酸、E-羥基肉桂酸、E-肉桂酸甲酯、阿魏酸、咖啡酸、1-O-feruloylglycerol、β-谷甾醇、單棕櫚酸甘油酯、胡蘿卜苷、尿嘧啶、胸嘧啶、腺苷等。曹新偉從梭砂貝母的鱗莖中共分離出33個化合物，其中有12個生物堿類成分，分別為川貝酮堿、梭砂貝母酮堿、梭砂貝母啶堿、去氫鄂貝定堿、貝母素乙、西貝素、異梭砂貝母堿、梭砂貝母堿、鄂貝定堿、異貝母素甲、貝母素甲、貝母辛、E-3，4，5-三甲氧基肉桂酸、E-對-甲氧基肉桂酸、E-肉桂酸、異-對-羥基肉桂酸、E-對-羥基肉桂酸甲酯、阿魏酸、咖啡酸、尿嘧啶、胸嘧啶、鳥苷、尿苷、胸苷、β-谷甾醇、胡蘿卜苷、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ，其中梭砂貝母啶堿為新化合物。

太白貝母FritillariataipaiensisP.Y.Li

太白貝母為2010年版中國藥典新收載的川貝母的來源植物，目前已發(fā)表的研究文獻較少?，F(xiàn)在已知太白貝母中含有的生物堿主要有貝母素甲、貝母素乙、貝母辛等，以及胞苷、尿苷、鳥苷、胸苷、腺苷、尿嘧啶、腺嘌呤等其他非生物堿類化合物。

甘肅貝母FritillariaprzewalskiiMaxim.

甘肅貝母成分分析現(xiàn)在可見的文獻報道較少，現(xiàn)在已知甘肅貝母中含有的生物堿類成分主要有岷貝堿甲、岷貝堿乙、梭砂貝母酮堿、西貝素、貝母辛、川貝酮、代拉文酮、貝母素甲、貝母素乙等以及多種微量元素。

藥理研究^[2]

川貝母是潤肺止咳的名貴中藥材，應(yīng)用歷史悠久，療效卓著，馳名中外，有清熱潤肺、化痰止咳、散結(jié)等功能，用于熱咳嗽、咯痰帶血、瘰疬腫毒、治虛勞咳嗽、吐痰咯血、心胸郁結(jié)、肺痿、肺癰、喉痹、乳癰。川貝母不僅具有良好的止咳化痰功效，而且能養(yǎng)肺陰、宣肺、潤肺而清肺熱，是一味治療久咳痰喘的良藥，因此，在許多治療急性氣管炎、支氣管炎、肺結(jié)核等病癥的中藥方劑或中成藥制劑中都有川貝，如蛇膽川貝露、川貝枇杷露等，這樣會增強治療疾病的效果。

鎮(zhèn)咳作用

貝母為常用的止咳化痰藥。中醫(yī)傳統(tǒng)認為浙貝母清熱化痰、散結(jié)消腫，川貝母潤肺止咳。對目前市場上常用的暗紫貝母、浙貝母等多種商品貝母進行了鎮(zhèn)咳藥理作用篩選發(fā)現(xiàn)11種貝母的總生物堿部分對小鼠氨水引咳均有顯著或非常顯著的鎮(zhèn)咳作用。除梭砂貝母和伊貝母外其余9種貝母的乙醇提取物亦有顯著的鎮(zhèn)咳作用。

祛痰作用

粘稠的痰易造成呼吸道阻塞而繼發(fā)感染，并刺激呼吸道引起咳嗽，因此祛痰藥的基木功用之一是使痰液變稀易于咳出。在川貝母咳喘平藥理作用的研究中發(fā)現(xiàn)，其具有較好的止咳平喘作用，主要機制：對急支動物氣管的病理損傷有修復(fù)作用；對氨水和枸櫞酸引咳有抑制作用。

平喘作用

哮喘是過敏原或其他非過敏因素引起的氣管和支氣管對各種刺激的反應(yīng)增高而導(dǎo)致廣泛、可逆的氣道狹窄。川貝母具有明顯的平喘功效，其平喘機制一般認為與其松弛支氣管平滑肌，減輕氣管、支氣管痙攣，改善通氣狀況有關(guān)。

鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用

貝母有抑制中樞作用。人們在研究中發(fā)現(xiàn)浙貝母堿和去氫浙貝母堿在2mg﹒kg^-1的劑量下能夠減少小鼠自發(fā)活動。并能對抗咖啡因所致的活動次數(shù)增加，與氯丙嘖對抗咖啡因的作用相協(xié)同。浙貝母堿和去氫浙貝母堿能夠延長小鼠戊巴比妥睡眠時間及提高睡眠率，對小鼠腹腔注射醋酸所致的扭體反應(yīng)也有抑制作用

保護膈肌及抗氧化作用

缺氧時，ATP生成減少，膈肌能量供應(yīng)不足；同時，缺氧可引起無氧酵解增強，酸性代謝產(chǎn)物增加，Ca2+不足或肌鈣蛋白與Ca2+的親和力改變，使膈肌的興奮—收縮偶聯(lián)發(fā)生障礙，導(dǎo)致膈肌疲勞。體內(nèi)因缺氧產(chǎn)生的氧自由基，引起膜脂質(zhì)過氧化、細胞內(nèi)鈣超載、能量消耗、細胞骨架紊亂，而這些病理變化均與組織損傷密切相關(guān)。SOD是組織自身產(chǎn)生的抗氧化酶，對組織或細胞具有保護作用。

抗?jié)冏饔?/h3>

局部潰瘍的形成是胃壁組織被胃酸和胃蛋白酶消化的結(jié)果，這種自我消化過程是潰瘍形成的直接原因。貝母總堿對大鼠結(jié)扎幽門性潰瘍、消炎痛型潰瘍及應(yīng)激性潰瘍都有一定的抑制作用，其抗?jié)冏饔脵C制之一可能是抑制了胃蛋白酶活性。

抗菌作用

川貝母醇提物對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌有明顯抑制作用。肖燦鵬等[46]發(fā)現(xiàn)貝母堿對卡他球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、克雷伯肺炎桿菌有抑制作用，雖然抗菌活性較弱，但是對于治療呼吸道感染是有幫助的。

提取工藝^[2]

目前，據(jù)已有的文獻報道，針對川貝母中主要的有效成分生物堿類成分進行的提取方法主要有滲漉提取法、回流提取法、酶解提取法、超臨界流體萃取法等方法。由于提取目標化合物之間的差異、各種方法考察的因素及評價指標不同以及試驗方法不同等因素，各種方法考察的提取工藝參數(shù)也不同。

1.滲漉提取法

川貝母有效成分為貝母生物堿和甾體皂苷類，均易溶于乙醇、甲醇等有機溶劑。

采用均勻設(shè)計安排試驗，以浸膏得率和西貝堿含量為考察指標，數(shù)據(jù)經(jīng)多元回歸處理，通過對川貝母滲漉提取工藝中具有影響效果的乙醇用量、乙醇濃度、滲漉時間三因素及條件進行優(yōu)化，根據(jù)回歸方程并結(jié)合實踐，優(yōu)選出川貝母提取工藝的實驗條件為：用l4倍量65％乙醇滲漉7h。楊遠姍[29]用正交實驗設(shè)計，以浸泡時間、滲漉速度、收集滲漉液體積、乙醇濃度為因素及條件進行優(yōu)化，以貝母辛作為評價指標，試驗結(jié)果表明提取工藝為70%乙醇浸泡24h，滲漉速度為3mL﹒min-1，收集10倍的滲漉液，貝母辛的提取率為0.016％，明顯高于其他濃度時的提取率。

2.回流提取法

通過實驗選擇比較了乙醚、甲醇、三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇(4∶1)等提取溶劑系統(tǒng)，并考察了提取方法和提取時間等因素的影響。試驗結(jié)果表明，2g藥材以氨水堿化1h，加混合溶劑三氯甲烷-甲醇(4∶1)40mL，80℃水浴熱回流提取1次，回流時間為2h的提取方法，即可以得到滿意的提取效果。

3. 酶解提取法

酶解提取法是指在傳統(tǒng)醇提工藝上增加一步酶解過程，使纖維素酶降解細胞壁中的纖維素，促進有效成分溶出，從而增加貝母總生物堿的提取效率。采用黑曲霉菌株生產(chǎn)的纖維素酶，通過正交試驗找出了酶輔助提取工藝的條件：提取溫度為60℃、pH值為4.5、酶用量為2.5g﹒L^-1、提取時間為3.5h。同時，比較未加酶和加酶兩種工藝所得的有效成分收率，發(fā)現(xiàn)貝母中總生物堿收率由原來的0.0765%上升到0.1065%，提高了39.2%。

4.超臨界流體萃取法

超臨界流體萃取法是一種新型的提取分離技術(shù)，利用超臨界流體的特殊性質(zhì)，在高壓條件下與待分離的固體或液體混合物接觸，調(diào)節(jié)系統(tǒng)的操作壓力和溫度，萃取出所需要的物質(zhì)，隨后通過降壓、升溫或吸附等方法，降低超臨界流體的密度，使萃取物得到分離，現(xiàn)廣泛應(yīng)用于中草藥有效成分的萃取。

參考文獻

[1] 顏曉燕,彭成.川貝母藥理作用研究進展[J].中國藥房,2011,22(31):2963-2965.

[2] 趙高瓊,任波,董小萍,童婷婷,張樂樂,向暉.川貝母研究現(xiàn)狀[J].中藥與臨床,2012,3(06):59-64.