背景及概述[1]
龍血素B是來源于傣藥龍血竭的一種查爾酮類化合物，有研究發(fā)現(xiàn)龍血素B具有很強(qiáng)的鎮(zhèn)痛活性目前龍血素B主要是從傣藥龍血竭中提取。
合成方法[1]
步驟一：以1，3，5-三甲氧基苯（Ⅰ）為原料，通過Vilsmeier-Haauc?；磻?yīng)制備反應(yīng)中間體2,4,6-三甲氧基苯甲醛（Ⅳ）。
在裝有攪拌器并放入冰浴的250ml的三口燒瓶中，加入8.76g（0.12mol）DMF，再將9.8g（0.064mol）POCl3緩慢滴加到三口燒瓶中，反應(yīng)0.5h后形成Vilsmeier配合物，再將10.10g（0.06mol）1，3，5-三甲氧基苯緩緩加到此絡(luò)合反應(yīng)液中。然后撤去冰浴，裝上冷凝管，將反應(yīng)瓶移至30℃的水浴里面攪拌反應(yīng)3h生成中間體后，將中間體反應(yīng)液倒入裝有60ml的冰水的燒杯中，用玻璃棒攪拌混勻后，在燒杯口封上封口膜后放入4℃冰箱里冷卻析晶，次日抽慮，得米白色粉末狀產(chǎn)物8.8g，產(chǎn)率74.68%。
步驟二：以對羥基苯乙酮（Ⅱ）和芐基氯（Ⅲ）為原料，通過親核取代反應(yīng)制備中間體4-芐氧基苯乙酮（Ⅴ）。
室溫下，在裝有攪拌器的250ml的三口燒瓶中，依次加入DMF（50ml）、對羥基苯乙酮（10g，0.0735mol）、K2CO3（20.2g，0.147mol）和芐基氯（10.228g，0.0808mol），然后在室溫下混合攪拌反應(yīng)16h，反應(yīng)畢，將反應(yīng)混合物倒入裝有60ml的冰水燒杯中，冷卻，再抽慮得到沉淀，干燥可得16.2g白色粉末狀目標(biāo)產(chǎn)物，產(chǎn)率98.38%。
步驟三：以步驟一和步驟二制備的反應(yīng)中間體（Ⅳ）和（Ⅴ）為原料，通過Claisen-Schmidt縮合反應(yīng)，制備反應(yīng)中間體2，4，6-三甲氧基-4′-芐氧基查爾酮（Ⅵ）。
在裝有磁力攪拌器及冷凝管的100ml磨口三頸瓶中，依次加入10ml甲醇，4-芐氧基苯乙酮（2.26g，0.01mol），攪拌下加入由30ml甲醇和氫氧化鉀(2.80g,0.10mol)配成的溶液，加熱至50℃,待原料藥溶解后，再加入2，4，6-三甲氧基苯甲醛（1.96g，0.01mol），加熱回流，薄層色譜監(jiān)控反應(yīng)直到反應(yīng)完成。停止反應(yīng)，待冷卻，抽濾，濾渣干燥，得黃色粉末狀固體物質(zhì)3.60g，即為目標(biāo)產(chǎn)物，產(chǎn)率89%。
步驟四：將（Ⅵ）催化加氫還原為2，4，6-三甲氧基-4′-羥基二氫查爾酮（龍血素B，Ⅶ）。
在裝有磁力攪拌器及冷凝管的100ml磨口三頸燒瓶中，依次加入甲醇（25ml）和2，4，6-三甲氧基-4′-芐氧基查爾酮（1.9g，0.005mol），攪拌下加入甲酸銨(1.8g，0.03mol)，10%Pd-C（0.2g）和甲醇（25ml），加熱至回流，待反應(yīng)完成后，過濾除去鈀碳，濾液減壓濃縮得到淡黃色油狀物，加入適量丙酮溶解，過濾除去多余的甲酸銨，再減壓濃縮得到油狀物，真空干燥，得到淡黃色固體物質(zhì)，用柱層析分離得到白色固體粉末即龍血素B1.11g，產(chǎn)率70%。龍血素B，又稱2，4，6-三甲氧基-4′-羥基二氫查耳酮，為白色粉末狀固體。所得產(chǎn)物經(jīng)檢測核磁，光譜數(shù)據(jù)如下：
1H-NMR(400MHz,DMSO-D6):δ2.78(2H,dd,J=9.5Hz,J=5.8Hz,-CH2Ar),2.99(2H，dd,J=9.6Hz,J=5.9Hz,-CH2CO),3.74(6H,s,-OCH3),3.76(3H,s,-OCH3),6.22(2H,s,H-2,5),6.85(2H,d,J=8.7Hz,H-3’,5’),7.84(2H,d,J=8.7Hz,H-2’,6’),10.32(1H,s,OH-4’)；
13C-NMR(125MHz，DMSO-d6)δ：198.1（C=O），161.9（C-4’），159.3（C-2,6），158.3（C-4），130.5（C-2’,6’），128.1（1’），115.2（C-3’,5’），108.6（1），90.7（C-3,5），55.6（2,6-OCH3），55.2（4-OCH3），37.9（C-α），18.3（C-β）。
經(jīng)核磁分析，步驟四所得產(chǎn)物的分子式C18H20O5，其核磁圖譜與已公開的龍血素B的核磁圖譜相符。
體內(nèi)分布研究[2]
郭晶晶等人研究了傳統(tǒng)名貴傣藥龍血竭中有效成分龍血素B在大鼠體內(nèi)重要組織的分布情況,同時探討長期模擬失重效應(yīng)對龍血素B分布的潛在影響。將SD大鼠分為正常重力組和模擬失重效應(yīng)組,采用21 d大鼠尾懸吊方法模擬長期失重效應(yīng),單次灌胃給予大鼠25 mg/kg龍血素B,于給藥1 h后收集心、肝、脾、肺、腎、胃、腸、腦、睪丸和骨骼肌10種組織,采用HPLC-MS/MS方法測定各組織中龍血素B質(zhì)量分?jǐn)?shù)。在正常重力組中,龍血素B在肝、胃分布較多,其次是腎、腸、心、脾、骨骼肌和肺,腦中最少。與正常重力組相比,模擬失重效應(yīng)組大鼠肝中龍血素B的質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著升高47.7%(p<0.05),腦中質(zhì)量分?jǐn)?shù)上升5.4倍(p<0.05);在腸和腎中質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著下降52.7%和22.0%(p<0.05);在大鼠胃、心、肺、脾、睪丸和骨骼肌中質(zhì)量分?jǐn)?shù)無顯著變化。龍血素B的分布具有明顯組織特異性,長期模擬失重效應(yīng)顯著改變龍血素B在大鼠肝、腸、腦、腎等重要組織的分布.
參考文獻(xiàn)
[1] [中國發(fā)明,中國發(fā)明授權(quán)] CN201710519342.8 一種龍血素B的衍生物及其制備和應(yīng)用
[2]郭晶晶,李玉娟,陳博,康麗婷,王識博,李勇枝,王佳平,高建義.龍血素B在模擬失重效應(yīng)大鼠體內(nèi)的分布研究[J].北京理工大學(xué)學(xué)報,2020,40(02):206-212.