背景[1-3]
磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體是一類可以特異性結(jié)合磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白的多克隆抗體，主要用于檢測磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白的免疫學實驗。
淀粉樣蛋白前體是指由定位于21號染色體長臂上的基因編碼合成的一類蛋白質(zhì)肽鏈，因其水解斷裂后，可產(chǎn)生一種由40～42個氨基酸組成的稱為淀粉樣蛋白的肽鏈，所以被稱為淀粉樣蛋白前體，簡稱為APP。APP存在于身體的多種組織中，由于組成肽鏈的氨基酸數(shù)目不同，已發(fā)現(xiàn)至少有3種不同的APP，大腦中存在較多的是APP695。APP合成后隨軸漿流轉(zhuǎn)運，多分布在突觸處。肽鏈的大部分在細胞外，為氨基端，細胞內(nèi)留有較短的羧基端。
磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白
APP釋放到細胞外是通過在接近細胞膜處的β淀粉樣肽鏈中部水解斷裂而釋放到細胞外。腦缺血、腦外傷等神經(jīng)元應激以及變異等可使APP產(chǎn)生過多，導致水解APP過程或部位異常，產(chǎn)生出β淀粉樣蛋白在神經(jīng)細胞內(nèi)外沉積，對神經(jīng)元造成損害。
APP常染色體顯性改變導致遺傳性早發(fā)阿爾茨海默病，結(jié)果或許也是蛋白水解過程的改變。認為APP與阿爾茨海默病有著密切的聯(lián)系。APP可以被α-，β-，γ-蛋白酶分解；其中β-蛋白酶和γ-蛋白酶的連續(xù)作用可使APP被分解產(chǎn)生Aβ。Aβ可以導致腦內(nèi)老年斑的形成和神經(jīng)細胞的凋亡，是導致阿爾茨海默病的重要因素。
應用[4][5]
用于淀粉樣肽前體蛋白對容量性鈣內(nèi)流調(diào)節(jié)作用的研究
阿爾茨海默氏癥（Alzheimer’s Disease,AD）是一種神經(jīng)退行性疾病。它包括兩個病理特征:淀粉樣斑和神經(jīng)纖維纏結(jié)。淀粉樣斑的主要成分是淀粉樣肽（Amyloidβ,Aβ）,它由淀粉樣肽前體蛋白（Amyloid Precursor Protein,APP）在β分泌酶和γ分泌酶切割下產(chǎn)生。
研究了APP及其水解產(chǎn)物對于細胞容量性鈣內(nèi)流的作用,在此基礎上對其作用機制進行了初步探討。
結(jié)果顯示:APP可以降低細胞的CCE。用穩(wěn)定表達野生型人APP695的N2a細胞APPwt與野生型的N2a細胞進行比較,發(fā)現(xiàn)APPwt細胞的CCE顯著降低,這說明人的APP695會引起細胞CCE的顯著降低。
分別用CCD系統(tǒng)和共聚焦系統(tǒng)證實了該結(jié)果。在敲除了APP基因的小鼠胚胎成纖維細胞中的實驗證明,鼠的APP同樣存在這種作用。
結(jié)果：APP分泌到胞外的水解產(chǎn)物sAPP對于細胞的CCE無顯著的作用。綜合β分泌酶抑制劑和γ分泌酶抑制劑的處理結(jié)果,推測APP的C端片斷可能在CCE的下降中起重要作用。轉(zhuǎn)入C99的細胞的CCE測定結(jié)果進一步證實了APP的C端片斷會降低細胞的CCE。
進一步的研究提示,APP的C端片斷與G蛋白的相互作用可能在CCE降低中發(fā)揮重要作用。
首次發(fā)現(xiàn)Aβ可以升高細胞的CCE,并發(fā)現(xiàn)其作用與Aβ在細胞膜上形成的通道密切相關。在APPswe細胞和APPwt細胞中均證實,Aβ的抗體可以引起細胞CCE的顯著降低。這提示,Aβ會升高細胞的CCE。這一作用在γ分泌酶抑制劑的處理結(jié)果中得到了證實。
用Aβ通道抑制劑氨丁三醇對細胞進行處理,其結(jié)果提示,Aβ在膜上形成的通道與Aβ引起的CCE升高密切相關。與此同時,我們在體內(nèi)和體外水平探討了Aβ通道抑制劑氨丁三醇在AD治療中的可能作用。研究結(jié)果顯示,低濃度的氨丁三醇不會影響細胞的存活。氨丁三醇會通過降低細胞內(nèi)活性氧的水平減少細胞凋亡,從而起到保護細胞免受Aβ毒性作用的效果。
參考文獻
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[5]牛穎.淀粉樣肽前體蛋白對容量性鈣內(nèi)流調(diào)節(jié)作用的研究[D].清華大學,2009.