背景^[1][2]

促胰液素系由小腸粘膜S細(xì)胞釋放出的一種多肽類激素。此激素在小腸上段粘膜較多，距幽門越遠(yuǎn)含量越少。鹽酸是引起此激素釋放的最強(qiáng)因素，其次是蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物，再其次為脂酸鈉。此激素主要作用于胰腺小導(dǎo)管的上皮細(xì)胞，使其分泌大量水分和碳酸氫鹽，因而使胰液分泌量大量增加，而酶的含量很低。此外，尚可促進(jìn)胃蛋白酶原分泌、十二指腸腺的分泌、小腸腺的分泌及胰島素的釋放等。

促胰液素(英文名Secretin)是由位于十二指腸和空腸上段粘膜中的S 細(xì)胞分泌，由27個(gè)氨基酸組成的具有螺旋結(jié)構(gòu)的堿性多肽，具有調(diào)節(jié)胰腺外分泌、抑制胃酸分泌和胃運(yùn)動(dòng)等多種生理功能，其肽序?yàn)闉镠SDGTFTSELSRLRDSA 24 RLQRLLQGLVNH2，現(xiàn)有技術(shù)secretin的逐步偶聯(lián)的合成，采用全液相合成，采用全液相合成的缺點(diǎn)在于合成范圍小，一般都集中在10個(gè)氨基酸以內(nèi)的多肽合成，還有合成中需要對(duì)中間體進(jìn)行提純，時(shí)間長，工作量大。

采用該方法，的逐步偶聯(lián)的合成總收率小于10%，固相采用Boc策略合成secretin，固相Boc 策略中，反復(fù)地用酸來脫保護(hù)，這種處理帶來了以下問題：如在肽與樹脂的接頭處，當(dāng)每次用50%TFA脫Boc基時(shí)，有約1.4%的肽從樹脂上脫落，合成的肽越大，這樣的丟失越嚴(yán)重；此外，酸催化會(huì)引起側(cè)鏈的一些副反應(yīng)，Boc合成法尤其不適于合成含有色氨酸等對(duì)酸不穩(wěn)定的肽類。

現(xiàn)有技術(shù)公開了一種片段偶聯(lián)法制備secretin，由于secretin結(jié)構(gòu)中既有多個(gè)疏水性 的Leu、Val，又有親水性的Lys、His和Arg等，使片斷的溶解性很差，進(jìn)而在片斷合成以及各片斷偶聯(lián)的過程中需要大量溶劑，且由于反應(yīng)液濃度較稀，使反應(yīng)不夠完全。另外，還有一種合成方法采用高氯酸保護(hù)的Arg，能改善片斷的溶解性，其先采用Z策略合成片斷，然后再脫除Z保護(hù)基后用高氯 酸處理得到高氯酸保護(hù)Arg的片斷。

由于上高氯酸前和上高氯酸后的片斷均需純化，故增加了合成和純化的工作量。上述現(xiàn)有技術(shù)雖能用于secretin的合成，但是收率較低，其中，secretin的液相逐步偶聯(lián)的合成總收率小于10%；固相Boc策略合成總收 率小于20%；采用高氯酸保護(hù)Arg的合成策略其合成總收率小于30%。因此，為提高secretin的合成收率，降低生產(chǎn)成本，提高該品的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)和廣泛應(yīng)用，需進(jìn)一步研究新的高收率合成方法。

結(jié)構(gòu)

發(fā)現(xiàn)歷程^[3]

“促胰液素”的發(fā)現(xiàn)過程是曲折和漫長的。從1850年現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)，到1902年促胰液素的確定，經(jīng)歷了半個(gè)多世紀(jì)。1850年法國實(shí)驗(yàn)生理學(xué)家克勞得伯爾納發(fā)現(xiàn)酸性食物進(jìn)入小腸引起胰液分泌現(xiàn)象，沒有引起世人注意。l894年，此現(xiàn)象被俄國巴甫洛夫?qū)嶒?yàn)室的道林斯基證實(shí)，但是當(dāng)時(shí)神經(jīng)論是主導(dǎo)思想，也是巴甫洛夫?qū)W派特別信仰的思想，所以人們認(rèn)為，酸性物質(zhì)引起的胰腺分泌是一個(gè)反射。

1896年，巴甫洛夫的另一個(gè)學(xué)生帕皮爾斯基(Popielski)切斷狗的雙側(cè)迷走神經(jīng)、雙側(cè)內(nèi)臟大神經(jīng)，以及損壞延髓后，反應(yīng)仍然出現(xiàn)。他設(shè)想可能存在著一個(gè)胰液分泌的“外周反射中樞”。1901年，帕皮爾斯基(Popielski)發(fā)現(xiàn)，即使切除了連接夠胰腺的全部神經(jīng)，鹽酸溶液仍能引起胰液分泌。帕皮爾斯基不得不修正他自己過去的假設(shè)，認(rèn)為這是一個(gè)“局部短反射”，想方設(shè)法把實(shí)驗(yàn)的結(jié)果向“神經(jīng)論”靠攏。

在他們進(jìn)行這樣的實(shí)驗(yàn)的同時(shí)，法國科學(xué)家沃泰默(Wertherimer)也進(jìn)行著同樣的實(shí)驗(yàn)，他也受到神經(jīng)論的影響。只得出在小腸和胰腺之間存在著一個(gè)頑固的局部反射這個(gè)結(jié)論。1902年1月，當(dāng)英國兩位生理學(xué)家貝利斯(Bayliss)和斯他林在進(jìn)行科研時(shí)候，發(fā)現(xiàn)了沃態(tài)默(Wertherimer)的論文，他們對(duì)此論文很感興趣，決定進(jìn)一步研究。

他們首先嚴(yán)格按照沃泰默(Wertherimer)實(shí)驗(yàn)過程進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果和沃態(tài)默(Wertherimer)的一樣，但是他們認(rèn)為這不是神經(jīng)調(diào)節(jié)而是化學(xué)調(diào)節(jié)，也就是說，在鹽酸的作用下，小腸黏膜可能產(chǎn)生了一個(gè)化學(xué)物質(zhì)．當(dāng)其被吸收入血液后，隨著血流被運(yùn)送到胰腺，引起胰液分泌。接著他們進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)證明他們的結(jié)論，斯他林(Starling)把同一條狗的另一段空腸剪下來，刮下黏膜，加砂子和稀鹽酸研碎．再把浸液中和、過濾．做成粗提取液，注射到同一條狗的靜脈中，結(jié)果，引起了比前面切除神經(jīng)的實(shí)驗(yàn)更明顯的胰液分泌。這就完全證了他們的設(shè)想。

一個(gè)刺激胰液分泌的化學(xué)物質(zhì)被發(fā)現(xiàn)了，這個(gè)物質(zhì)被命名為促胰液素。這是生理學(xué)史上一個(gè)偉大的發(fā)現(xiàn)．在發(fā)現(xiàn)促胰液素后，激素被一個(gè)一個(gè)地發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)生了“激素調(diào)節(jié)”的概念，并催生了“內(nèi)分泌學(xué)”這門新學(xué)科。

應(yīng)用[4][5]

促胰液素的生理學(xué)可概括如下：(1) 促胰液素是消化期間引起胰腺分HCI的主要激素；(2) 促胰液素的釋放主要依賴于流入十二指腸內(nèi)的HCI；( 3) 膽汁和脂肪酸等也可刺激促胰液素的釋放，(4 ) 抑制胃泌素的釋放和胃酸分泌是促胰液素的另一個(gè)生理作用；(5 ) 膽堿能神經(jīng)不能影響促胰液素的釋放，但可影響促胰液素刺激胰液分泌的作用；(6) 全身的毛細(xì)血管床都能夠分解促胰液素?？傊?， 促胰液素是一種真正的激素，它在胰液和胃酸分泌的調(diào)節(jié)中起著重要的作用。

促胰液素和同族的胰高血糖素、腸抑胃肽、血管活性腸肽有些類似。促胰液素具有促進(jìn)胰液分泌，增加胰液總量及所含重碳酸鹽等生理作用，研究報(bào)道，促胰液素對(duì)消化道潰瘍及腫瘤具有一定的治療作用，還廣泛用于胰外分泌機(jī)能試驗(yàn)，診斷胰腺疾患。

制備^[2]

一種固相制備促胰液素的方法，包括以下步驟：

1) 選擇合適的固相載體；

2) 按照固相合成方法，逐個(gè)偶聯(lián)氨基酸；

3) 裂解，得到粗肽；

4) 粗肽經(jīng)純化得到Secretin。

主要參考資料

[1]  新編實(shí)用醫(yī)學(xué)詞典

[2] CN201310073954.0 一種固相制備促胰液素的方法

[3] “賈永見. “促胰液素” 的發(fā)現(xiàn)歷程及具體步驟[J]. 考試周刊, 2012, 38: 138. 

[4]  Chey W Y. 促胰液素的發(fā)現(xiàn)和再發(fā)現(xiàn)[J]. 生理科學(xué)進(jìn)展, 1981, 4: 029.

[5] CN201610721976.7 促胰液素在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的用途