背景及概述

Rab5抗體用經(jīng)過適當修飾的人工合成的人Rab5的一段多肽(aa2-14)作為抗原制備而成的抗Rab5小鼠單克隆抗體?？寺√枮镽ab5-65。Rab5抗體識別的是總Rab5(total Rab5)，可以檢測內源性的Rab5。Rab5是小Rab GTPases的Ras超家族成員。Rab5主要定位于早期內體(early endosome)，在細胞質膜上也有分布，在內吞作用早期的囊泡運輸過程中起關鍵調節(jié)作用。Rab5 GTP和Rab5 GDP之間的構像改變是內吞過程多個步驟的限速因素。Rab5與GDP結合處于非激活狀態(tài)，與TP結合處于激活狀態(tài)。這兩種狀態(tài)之間的轉換則由GEPs(GEP/GTP exchange factors)、GDIs(GDP-dissociationi inhibitors)和GAPs(GTPase-activating proteins)所調控。Rab通過與幾種Rab5特異性的效應蛋白相互作用而發(fā)揮其功能。這些效應蛋白在內體(endosome)的特定Rab結構域(Rab domain)和Rab5形成復合物，促進Rab5載運目標貨物(Rab5-cargo targets)在內體和質膜之間的循環(huán)利用。Rab5常被用作早期內體的分子標記(early endosome marker)。

使用方法

Rab5抗體使用時配套使用Western一抗稀釋液，可以用于Western檢測時的一抗稀釋。抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據(jù)抗原水平的高低作適當調整)：

保存條件

Rab5抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會導致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。

注意事項

在Western實驗后，請注意回收稀釋的抗體?；厥盏目贵w在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體，4℃保存。回收后重復使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。