背景^[1][2]

CDKS(細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶)是絲氨酸蘇氨酸激酶家族，被周期蛋白激活后，調(diào)控細(xì)胞周期的進(jìn)程。目前己發(fā)現(xiàn)CDK1-CDK8。CDK5是CDK家族的特殊一員，但不參與細(xì)胞周期的調(diào)控。CDK表達(dá)分布于全身組織，但神經(jīng)系統(tǒng)是最主要富集組織。成年動(dòng)物大腦是唯一含大量激活型CDK5的組織網(wǎng)。在已分化成熟的神經(jīng)元中，以CDK5的活性為主，而其他CDK5基本沒(méi)有活性，因此CDK5可能是神經(jīng)元死亡的上游感受器。CDK5的調(diào)節(jié)蛋白是p35和其類(lèi)似物p39，盡管在各種類(lèi)型細(xì)胞中均有表達(dá)，由于和主要分布于神經(jīng)元，所以其活性主要集中于神經(jīng)元。

生理狀態(tài)下，CDK5在p35、p39等調(diào)節(jié)亞基的信號(hào)作用下錨定于膜上，磷酸化膜性底物，通過(guò)平衡促凋亡和促存活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，在神經(jīng)元發(fā)育、遷移、神經(jīng)元存活中發(fā)揮重要作用。在哺乳動(dòng)物海馬神經(jīng)元的學(xué)習(xí)和記憶功能中發(fā)揮重要作用。

CDK5的活性需要被精細(xì)調(diào)節(jié)，在興奮性毒性刺激下（如H2O2、興奮性氨基酸、β淀粉樣蛋白內(nèi)、自由基、氧化應(yīng)激），經(jīng)過(guò)鈣激活蛋白酶作用，p35能在梭基末端第位裂解成p25和另一大小為片斷，p25雖比p35片段小，但具備完備的激活CDK5的功能，半衰期卻比p35長(zhǎng)一倍，由于缺乏膜錨定信號(hào)基序，致使p25- CDK5復(fù)合物細(xì)胞內(nèi)定位發(fā)生改變，無(wú)節(jié)制地磷酸化其適宜底物，引發(fā)病理性改變。因此，p25是p35被calpain剪切后殘留下來(lái)的羧基端(carboxy-terminal)部分，比p35可以更長(zhǎng)時(shí)間地激活Cdk5。p25在腦部的累積被認(rèn)為和老年癡呆癥有一定關(guān)系。

p35/p25抗體(p35/p25 antibody)為進(jìn)口分裝，用人工合成的人p35/p25羧基端(carboxy-terminal)的一段多肽進(jìn)行適當(dāng)修飾后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽親和柱經(jīng)過(guò)兩步純化而得到的高純度抗體。p35/p25抗體不僅可以識(shí)別p35，也同時(shí)可以識(shí)別p25。p35/p25抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長(zhǎng)期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。

主要參考資料

[1] 韓永清, 孫愛(ài)民, 劉鵲凌, 等. X 線照射原代培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元后 p35, p25 的表達(dá)及 Cdk5 激酶活性變化[J]. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2009, 29(3): 405-407.