背景及概述[1][2]
白樺脂酮酸是一種廣泛分布于多種植物中的五環(huán)三萜類化合物，在白樺樹皮中的含量為0.25～2％(以干品計)。白樺脂酮酸具有抗腫瘤、抗病毒和抗炎等生物活性，其中以抗黑色素瘤而聞名。研究發(fā)現(xiàn)，白樺脂酮酸能誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡(apoptosis)，抑制腫瘤生長和對抗血管新生，且對于正常細(xì)胞與癌細(xì)胞間具有選擇性的毒殺作用，展現(xiàn)其在癌癥治療的潛力。除此以外，白樺脂酮酸還在抗艾滋病毒方面有新的機制，這使得白樺脂酮酸成為很有開發(fā)前景的活性藥物。
制備[1-2]
方法一
在白樺樹皮提取白樺脂醇工藝中，白樺脂酮酸往往隨著白樺脂醇提取的廢棄物而被忽略，這一部分往往被當(dāng)做廢棄物丟棄。研究發(fā)現(xiàn)，這部分廢棄物中白樺脂酮酸含量達(dá)到15～20％。因此，對這部分廢棄物的利用方法加以研究，從中提取高附加值的高純度天然白樺脂酮酸具有較強的實際意義。CN201811029936.1提供一種有效地從白樺樹皮提取白樺脂醇工藝產(chǎn)生的廢棄物中制取高純度天然的白樺脂酮酸的方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中未能有效利用白樺脂醇提取的廢棄物的問題。本發(fā)明操作簡單、得率高，可應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)，產(chǎn)品符合藥用標(biāo)準(zhǔn)。步驟如下：
(1)取白樺脂醇提取工藝的廢棄物體120.0g(白樺脂酮酸含量為15.3％，白樺脂醇含量為35.6％)，加入1700ml氯仿，攪拌下加入3％的氫氧化鈉水溶液720ml，室溫攪拌1小時，此時有淡黃色白樺脂酮酸鈉鹽固體析出，飄浮在氯仿上層。過濾、烘干得到白樺脂酮酸鈉鹽粗品24.2g(白樺脂酮酸含量為60.3％，白樺脂醇含量為1.1％)；
(2)將24.2g白樺脂酮酸鈉鹽粗品溶于400ml 90％的乙醇中，加入2.4g氫氧化鈉固體，75℃～80℃下攪拌1小時，此時有大量金屬光澤的沉淀生成。過濾得到一次純化后的白樺脂酮酸鈉鹽14.3g；
(3)將12.3g一次純化后的白樺脂酮酸鈉鹽加入到150ml 80％的乙醇中，攪拌下滴加濃度為3％的稀鹽酸100ml，滴加完畢后繼續(xù)攪拌1小時，過濾，水洗，烘干得到純化后的白樺脂酮酸12.1g(白樺脂酮酸含量為92.3％，白樺脂醇含量為0.5％)；
(4)將12.1g純化后的白樺脂酮酸加入到1200ml甲醇中，加熱回流1小時，趁熱過濾不溶物，濾液在0～5℃的環(huán)境下靜置過夜，大量白色針狀白樺脂酮酸晶體析出，過濾、烘干得到6.4g高純度的天然白樺脂酮酸(白樺脂酮酸含量為98.2％，白樺脂醇含量為0.3％)。
(5)提取分離純化過程總得率35.6％。
本制備方法從白樺脂醇提取工藝的廢棄物中簡單、高效分離得到高純度白樺脂酮酸，全過程操作簡單，生產(chǎn)周期短，成本低，純化得到的白樺脂酮酸純度高(白樺脂酮酸純度≥98.0％，白樺脂醇含量≤0.5％)。本發(fā)明利用白樺樹皮提取物中各種成分的性質(zhì)，從白樺脂醇提取工藝的廢棄物中分離得到高純度白樺脂酮酸，使自然資源得到充分利用，該方法可以方便的應(yīng)用于工業(yè)大規(guī)模生產(chǎn)。
方法二、
CN201710821556.0提供了一種制備白樺脂酮酸的方法，該方法操作方便，可工業(yè)化實施，尤其能解決背景技術(shù)存在的產(chǎn)率低，反應(yīng)過程不易控制及反應(yīng)條件苛刻等問題。包括以下步驟：
(1)將白樺脂醇加到一定比例的咪唑型離子液中；
(2)在步驟(1)的溶液中加入一定量的ClO2，在一定溫度下，控制攪拌轉(zhuǎn)速，反應(yīng)一 段時間，然后常溫減壓蒸餾，除去ClO2；
(3)用一定量的乙酸乙酯對步驟(2)的溶液進行萃取，然后濃縮回收乙酸乙酯至稠 膏狀，再用一定量的丙酮重結(jié)晶、過濾，得到白樺酮酸；
(4)用一定量的四氫呋喃溶劑溶解步驟(3)得到的白樺酮酸，再加入一定量的硼氫 化鈉粉末，控制攪拌轉(zhuǎn)速，冰水浴中反應(yīng)一段時間；
(5)加入一定量的氯化銨，過濾除去硼氫化鈉和析出的未反應(yīng)底物等雜質(zhì)，再減壓蒸餾，得到白樺脂酮酸粗品；
(6)用一定量的甲醇加熱溶解步驟(5)得到的白樺脂酮酸粗品至澄清，冷卻、重結(jié)晶，得到白樺脂酮酸純品。
制劑[3]
CN201611012105.4提供一種操作簡單、反應(yīng)易控制、重復(fù)性高的納米花狀鈀-金包覆的白樺脂酮酸脂質(zhì)體。
上述白樺脂酮酸脂質(zhì)體的制備方法如下：
1、制備谷胱甘肽修飾的白樺脂酮酸納米脂質(zhì)體
(1)各原材料的質(zhì)量比為：大豆卵磷脂：膽固醇：白樺脂酮酸＝12～20:1.3～2.1:1， 按每毫升無水乙醇加入上述三種溶質(zhì)質(zhì)量的總和為14.3～23.1mg，加入無水乙醇并超聲，超聲功率為40～80W，超聲時間為10-20min，使其完全溶解得到脂質(zhì)溶液；
(2)取谷胱甘肽溶解于去離子水中，得到谷胱甘肽溶液，每毫升去離子水中含0.3 ～1mg谷胱甘肽；以脂質(zhì)溶液與谷胱甘肽溶液的體積比為1:1.5～3.5，磁力攪拌并且溫度控 制在38～47℃，將步驟(1)獲得的脂質(zhì)溶液逐滴加入到的谷胱甘肽溶液中，得到脂質(zhì)體懸液；
(3)將步驟(2)得到的脂質(zhì)體懸液在28～35℃，100～130rpm，3～7小時進行磁力攪 拌，除去脂質(zhì)體懸液中的無水乙醇，得到谷胱甘肽修飾的白樺脂酮酸納米脂質(zhì)體。
2、制備納米花狀鈀-金合金包覆的白樺脂酮酸納米脂質(zhì)體
(1)以氯化鈀溶液與抗壞血酸溶液的體積比為100:1～4的比例，將摩爾濃度為50～100mM的抗壞血酸溶液，滴加到摩爾濃度為0.5～1.5mM的氯化鈀溶液中，迅速混合均勻，直至顏色變?yōu)闇\綠色，即得到鈀納米粒子溶液，置于常溫貯存，備用；
(2)將步驟(1)得到的鈀納米粒子溶液與步驟1制得的谷胱甘肽修飾的白樺脂酮酸納 米脂質(zhì)體按1:1～5的體積比混合均勻，置于搖床，25～30℃，85～115rpm，避光孵育8～16小時，即得到鈀納米粒子包覆的白樺脂酮酸納米脂質(zhì)體；
(3)按氯化金溶液與鈀納米粒子包覆的白樺脂酮酸納米脂質(zhì)體的體積比為1:0.5～1.5的比例，向步驟(2)獲得的鈀納米粒子包覆的白樺脂酮酸納米脂質(zhì)體中加入摩爾濃度為2～8mM氯化金溶液，充分混勻；隨后向混合液中加入摩爾濃度為50～100mM鹽酸羥胺溶液，充分混合均勻，鹽酸羥胺溶液與氯化金溶液的體積比為1～5：10，將其置于搖床，25～30℃，85～115rpm，孵育6～12小時，制得納米花狀鈀-金包覆的白樺脂酮酸脂質(zhì)體。
與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下優(yōu)點：
1、在常溫、常壓及溫和條件下完成制備，操作簡單，反應(yīng)易控制，重復(fù)性高。
2、制備的納米花狀鈀-金包覆的白樺脂酮酸脂質(zhì)體的粒徑更易于在腫瘤部位積累， 達(dá)到更好的治療效果。
3、制備的納米花狀鈀-金包覆的白樺脂酮酸脂質(zhì)體與現(xiàn)有的球殼狀藥物載體相比，各向異性比較好，其在500-900nm寬波長范圍內(nèi)處存在近紅外吸收，具有良好的光熱轉(zhuǎn)化性能，使包載的抗腫瘤藥物白樺脂酮酸實現(xiàn)可控釋放。
4、制備的納米花狀鈀-金包覆的白樺脂酮酸脂質(zhì)體在近紅外激光照射下，能夠?qū)⒐鉄嶂委熍c化療結(jié)合協(xié)同治療癌癥，與單一光熱療技術(shù)或單純化療相比更加高效、低毒。
主要參考資料
[1] CN201811029936.1 一種高純度白樺脂酮酸的制備方法
[2] CN201710821556.0 一種制備白樺脂酮酸的方法
[3] CN201611012105.4 一種納米花狀鈀?金包覆的白樺脂酮酸脂質(zhì)體及其制備方法