化學(xué)發(fā)光法用于新冠病毒抗體檢測(cè)具有重要的臨床價(jià)值,AMPPD作為一種理想的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)是新冠病毒抗體測(cè)定(化學(xué)發(fā)光法)試劑盒的重要組分。
AMPPD,通用名是3-(2-螺旋金剛烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧環(huán)乙烷二鈉鹽。AMPPD是一種生物化學(xué)領(lǐng)域中最新的超靈敏的堿性磷酸酶底物,在生物檢測(cè)技術(shù)中有著廣泛的應(yīng)用。
AMPPD的分子結(jié)構(gòu)中存在一個(gè)-O-O-鍵很弱的四元雜環(huán)和一個(gè)磷酸根基團(tuán),磷酸根基團(tuán)維持著整個(gè)分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。在通常情況下,這種化合物很穩(wěn)定,5℃下保存的固體AMPPD幾乎不分解。當(dāng)有堿性磷酸酶催化作用時(shí),AMPPD發(fā)生磷酸根基團(tuán)水解,形成一個(gè)不穩(wěn)定的中間體。這個(gè)中間體隨即自行分解,-O-O-四元環(huán)釋放出大量能量,激發(fā)化學(xué)發(fā)光反應(yīng),發(fā)射光子。AMPPD有2~30min的分解半衰期,發(fā)出波長(zhǎng)為470nm的持續(xù)性光,在15min時(shí)其強(qiáng)度達(dá)到高峰,15~60min內(nèi)光強(qiáng)度保持相對(duì)穩(wěn)定。
劉萍,黃愛(ài)龍等人將AMPPD作為化學(xué)發(fā)光底物液用于新型冠狀病毒IgM/IgG磁微?;瘜W(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒。堿性磷酸酶或辣根過(guò)氧化物酶催化其發(fā)光,以測(cè)定各樣本管的發(fā)光值(RLU)。樣本的發(fā)光值與其中的新型冠狀病毒IgM/IgG抗體濃度呈正相關(guān),從而檢測(cè)人血清中的新型冠狀病毒IgM/IgG抗體。
文莉惠將AMPPD作為發(fā)光底物用于新型冠狀病毒SARS-CoV-2 S蛋白檢測(cè)方法的試劑盒中。酶結(jié)合物催化AMPPD發(fā)射光子,光子的數(shù)量與樣本中S蛋白的濃度成正比,將SARS-CoV-2重組S蛋白梯度稀釋作為檢測(cè)系統(tǒng)校準(zhǔn)品,通過(guò)濃度-相對(duì)發(fā)光值(RLU)的校準(zhǔn)曲線,計(jì)算出樣本中S蛋白的濃度。
AMPPD的合成工藝較為復(fù)雜,目前已公開(kāi)的利用工業(yè)化生產(chǎn)的方法并不多。