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2-氯-4-硝基苯-α-L-巖藻糖苷測定α-L-巖藻糖苷酶及性能評價

2022/11/29 9:55:33

2-氯-4-硝基苯-α-L-巖藻糖苷用于檢測血清中巖藻糖苷酶(AFU)的含量,研發(fā)和大量制備AFU檢測試劑。α-L-巖藻糖甘酶(AFU)是一種存在于生物體內的酸性水解酶。大量的研究資料表明,血清AFU在診斷原發(fā)性肝癌(PHC)方面有重要價值;因此,建立一種方便、適用的AFU檢測方法有著重要意義。有研究人員基于AFU催化水解2-氯-4-硝基苯-α-L-巖藻糖苷(CNP-AFU)生成黃色的氯硝基苯酚(CNP),經反復試驗確定了實驗條件,建立起簡便、靈敏、穩(wěn)定的檢測體液中AFU活性的動力學法,該方法試為液體穩(wěn)定的單一試劑、適用于全自動生化儀操作,并用于血清中AFU活力的測定,均獲得滿意結果。

2-氯-4-硝基苯-alpha-L-巖藻糖苷的性狀圖.jpeg

研究方法

1.樣本

來自健康體檢者血清樣本。

2.測定方法

樣品中AFU水解試劑中2-氯對硝基-α-L-巖藻吡喃糖苷生成氯硝基苯酚和巖藻糖,而引起在波長405 nm處吸光度的上升,其上升的速率與AFU活力呈正比。通過監(jiān)測405 nm處吸光度上升的速率,可以計算出樣品中AFU的活性。即在實驗條件下,1000 mL樣品中AFU每分鐘水解1 μmol/L的CNP-AFU發(fā)生轉變?yōu)?U的AFU酶量為1個單位,簡稱U/L。

結論

AFU廣泛分布于人體組織細胞、血液和體液中。參與體內糖蛋白、糖脂和寡糖的代謝。由于AFP陰性的原發(fā)性肝癌患者AFU明顯升高,因此它作為原發(fā)性肝癌(PHC)血清酶標志物,其特異性和敏感性愈來愈受到重現(xiàn),被認為是原發(fā)性肝癌的一種新的腫瘤標記物。AFU與腺苷脫氨酶(ADA)聯(lián)合檢測能很好診斷肝癌,與甲胎蛋白(AFP)和CA199聯(lián)合檢測可將原發(fā)性肝癌的敏感性大大提高。因此,AFU的檢測對肝癌高發(fā)人群的檢查、肝癌的早期診斷、療效判斷及預后有著極其重要的意義。

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