基本信息
人參皂甙 Re，外文名稱：Ginsenoside Re，分子式：C48H82O18，分子量：947.14，是四環(huán)三萜類衍生物。無色針狀結(jié)晶(50%乙醇或含水甲醇)。熔點(diǎn)201~203℃。旋光度0~-1.00 (c=1.00，甲醇)。L-B反應(yīng)(+)，Molish反應(yīng)(+)。全乙?；餅榫Х郏埸c(diǎn)136℃。人參皂甙 Re主要來源于五加科植物人參[Panax ginseng C.A.Mey er(P. schinseng Nees)]的根、花蕾、葉、蘆頭、莖，西洋參(P. quinquefolium L.)的根中。
背景技術(shù)
有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，人參的藥理作用與其富含的皂甙成分密切相關(guān)，人參皂甙 Re就是其中主要的活性成分之一。將有效成分效率的提取出來，而不使有效成分的量降低，這是提取工藝的關(guān)鍵。有文獻(xiàn)報(bào)道測(cè)定人參中人參皂甙 Re含量的方法有：薄層掃描法、紫外可見分光光度法、HPLC法等，以下將介紹采用反相高效液相色譜法測(cè)定人參皂甙 Re含量的方法來反應(yīng)蒸煮提取的效果，該方法簡(jiǎn)便、快速、可靠。
檢測(cè)方法
1、色譜條件
色譜柱YMC-C18柱（150mm×4.6mm），流動(dòng)相為乙腈-水（25:75），檢測(cè)波長(zhǎng)203nm，柱溫室溫，流速 1ml/min,在此條件下樣品中的人參皂甙 Re與其它相關(guān)峰均能達(dá)到基線分離。特征峰保留時(shí)間在10min左右。
2、對(duì)照品貯備溶液及供試品溶液的制備
取人參皂甙 Re對(duì)照品約10.0mg精密稱定， 置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備溶液。稱取人參藥材10.0g，加水回流提取兩次，每次1h，合并濾液，供煎煮穩(wěn)定性考察使用，精密量取此濾液5ml，加水飽和正丁醇溶液提取4次，每次加入2ml，合并正丁醇溶液，揮干，精密加入0.5ml甲醇溶解，即得供試品溶液。
3、線性關(guān)系
精密吸取對(duì)照品貯備溶液適量， 置10ml容量瓶中，用甲醇稀釋定容，使?jié)舛确謩e為9.9,19.8,39.6,79.2,158.4,198,237.6ug/ml, 吸取上述溶液20ul，進(jìn)樣，以人參皂甙 Re的峰面積為橫坐標(biāo)，人參皂甙Re的濃度為縱坐標(biāo)，回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。
4、精密度試驗(yàn)
按上述色譜條件，精密吸取3種不同濃度的對(duì)照品溶液于同日內(nèi)測(cè)定5次，,計(jì)算其日內(nèi)精密度；以3種不同濃度的對(duì)照品溶液于5d 內(nèi)分別測(cè)定，計(jì)算其日間精密度。
5、重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)
取上述人參藥材煎煮液5份，,按供試品制備與測(cè)定項(xiàng)下所述方法測(cè)定。
6、加樣回收率試驗(yàn)
精密吸取已知含量的供試品溶液適量，分別加入不同量的人參皂甙 Re對(duì)照品貯備液，作為測(cè)定溶液，測(cè)定并計(jì)算回收率。
7、樣品液的含量測(cè)定
精密吸取不同時(shí)間的樣品液20ul進(jìn)樣分析，記錄色譜圖，用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得樣品液的濃度。
參考文獻(xiàn)
[1]周靜,王彩琴,袁媛,等. 人參皂甙Re提取方法的研究[J]. 西北植物學(xué)報(bào),2003,23(4):667-670.