背景

1.1-二苯基-2-苦肼基又名2,2-二(4-叔辛基苯基)-1-苦肼基自由基，2,2-二(4-叔辛基苯基)-1-苦基肼等，縮寫(xiě)表示為DPPH，化學(xué)式為C₃₄H₄₄N₅O₆，分子量為618.74，性狀為暗紫色大棱柱形晶體，在127～129度會(huì)分解。該品具有刺激性，吸入、口服或皮膚接觸對(duì)人體有害，大量使用時(shí)應(yīng)穿適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和戴手套。

1.1-二苯基-2-苦肼基是一種很穩(wěn)定的氮中心的自由基，它的穩(wěn)定性主要來(lái)自共振穩(wěn)定作用的3個(gè)苯環(huán)的空間障礙，使夾在中間的氮原子上不成對(duì)的電子不能發(fā)揮其應(yīng)有的電子成對(duì)作用。有關(guān)于該化合物具有用于定量測(cè)定生物試樣、純化合物、提取物的體外抗氧化能力的DPPH法，該法于1958年被提出，廣泛用于地量測(cè)定生物試樣、分類物質(zhì)好和食品的抗氧化能力。此法是根據(jù)DPPH自由基有單電子，在517nm處有一強(qiáng)吸收，其醇溶液呈紫色的特性。當(dāng)有自由基清除劑存在時(shí)，由于與其單電子配對(duì)而使其吸收逐漸消失，其褪色程度與其接受的電子數(shù)量成定量關(guān)系，因而可用分光光度計(jì)進(jìn)行快速的定量分析。

應(yīng)用

1.1-二苯基-2-苦肼基主要用于抗氧化成分的體外抗氧化性評(píng)價(jià)[1-3]，也可用作阻聚劑。下面是其作為抗氧化性評(píng)價(jià)物質(zhì)的研究實(shí)例：

（1）為研究了水和多種有機(jī)溶劑以及PH值對(duì)1,1-二苯基-2-苦肼基自由基分析法的影響進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)所試溶劑對(duì)測(cè)定體系的影響不大，通過(guò)扣除溶劑的影響后，同一種抗氧化劑在不同溶劑中的抗氧化活性相近，表明該分析體系可用于水及多種有機(jī)溶劑提取物抗氧化性質(zhì)的研究；PH值對(duì)分析體系的影響較大，強(qiáng)酸、強(qiáng)堿使 1.1-二苯基-2-苦肼基溶液迅速失效，在PH2~10范圍內(nèi)物質(zhì)的抗氧化活性隨PH值的升高而降低[4]。

（2）為了更加迅速地篩選到亞麻籽復(fù)雜提取物中的抗氧化活性物質(zhì)及其活性強(qiáng)弱，以開(kāi)環(huán)異落松樹(shù)脂酚二葡萄糖苷(SDG)，開(kāi)環(huán)異落葉松樹(shù)脂酚(SECO)和腸二醇(ED)3種木酚素為研究對(duì)象，建立抗氧化活性能力篩選的2,2-二苯基-1-苦肼基-高效液相色譜法(DPPH-HPLC法)。液相色譜條件為：流動(dòng)相為乙腈和水，經(jīng)反相色譜柱Waters XBridge C18分離，檢測(cè)波長(zhǎng)為280 nm。DPPH-HPLC法的步驟是：將單一或者混合抗氧化劑分別與DPPH混合，放置20 min，作為待測(cè)液，將同樣量的相應(yīng)抗氧化劑作為對(duì)照液，分別進(jìn)行液相色譜分析獲得其含量，計(jì)算出相應(yīng)的抗氧化劑清除率(SRA)，活性順序?yàn)椋篠DG、SECO、ED。結(jié)合超高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用法可以鑒定出亞麻籽中5種抗氧化物及篩選其抗氧化能力。上述建立的DPPH-HPLC法能夠有效完成復(fù)雜亞麻籽提取物的抗氧化活性物質(zhì)篩選[5]。

參考文獻(xiàn)