背景技術(shù)

α?淀粉酶在人體生理循環(huán)中起著關(guān)鍵作用，被用作一些相關(guān)疾病的重要指標(biāo)，如急性胰腺炎、急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒、焦慮或抑郁等。 4,6-亞乙基-對(duì)硝基苯-Α-D-麥芽七糖苷(EPS?G7)作為α?淀粉酶的底物，是一種體外檢測(cè)人血清或尿液中α?淀粉酶(AMS)活性的商用檢測(cè)試劑，具有靈敏度高、抗干擾能力強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)。其分子量為1299.41，是白色或近白色固體粉末。

4,6-亞乙基-對(duì)硝基苯-Α-D-麥芽七糖苷由對(duì)硝基苯(G1)?α?D?麥芽七糖苷(pNP?α?G7)經(jīng)一步化學(xué)修飾得到，因此pNP?α?G7的制備是合成EPS?G7的關(guān)鍵。到目前為止，文獻(xiàn)中pNP?α?G7都是通過酶法制備，最常見的方法有兩種。第一種是將α?環(huán)糊精開環(huán)得到麥芽六糖，再與對(duì)硝基苯?α?D?葡萄糖苷(pNP?α?G1)在酶的催化下合成pNP?α?G7。第二種是轉(zhuǎn)糖基化法，由pNP?α?G1和麥芽七糖在 轉(zhuǎn)移酶催化下制備pNP?α?G7。

化學(xué)合成4,6-亞乙基-對(duì)硝基苯-Α-D-麥芽七糖苷的關(guān)鍵在于pNP?α?G7的α?選擇性合成。而目前糖基化反應(yīng)的方法 大多生成β?糖苷，α?糖苷，特別是1,2?順式?α?糖苷的化學(xué)合成較難實(shí)現(xiàn)立體選擇性，且現(xiàn)有的方法存在底物活化步驟長(zhǎng)、底物受限、需要金屬催化劑參與等不足。因此，開發(fā)新型合成方法實(shí)現(xiàn)1,2?順式?α?糖苷鍵的構(gòu)建并應(yīng)用于4,6-亞乙基-對(duì)硝基苯-Α-D-麥芽七糖苷的化學(xué)合成具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

制備方法

(1)β?環(huán)糊精A與醋酐在20?30℃下反應(yīng)12h，得到β?乙酰環(huán)糊精B；

(2)將中間體B溶于乙酸酐/濃硫酸(V/V＝49:1)的混合液中，在40?60℃下反應(yīng) 24h，得到鏈狀乙?；咛荂；

(3)在縮合試劑存在的條件下，中間體C與對(duì)硝基苯酚在0?40℃反應(yīng)1?9h，得到以α 為優(yōu)勢(shì)構(gòu)型的關(guān)鍵中間體p?硝基苯基(G1)?O?乙?；?D?麥芽七糖苷D； 

(4)關(guān)鍵中間體D與甲醇鈉在20?30℃下反應(yīng)24?48h，得到pNP?α?G7(p?硝基苯基 (G1)?D?麥芽七糖苷)； 

(5)pNP?α?G7在對(duì)甲苯磺酸和二甲氧基乙烷的存在下，在55℃反應(yīng)24h，得到EPS?G7(4,6-亞乙基-對(duì)硝基苯-Α-D-麥芽七糖苷)。

參考文獻(xiàn)

[1]浙江大學(xué). 一種EPS-G7的化學(xué)合成方法:CN202310039000.1[P]. 2023-05-09.