背景[1-3]
大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)Elisa試劑盒是一種用于體外定量檢測大鼠樣本中促甲狀腺素釋放激素（TRH）濃度的實驗試劑盒。這些試劑盒主要用于科研目的，不適用于臨床診斷。以下是關(guān)于大鼠促甲狀腺素釋放激素（TRH）ELISA試劑盒的一些詳細(xì)信息：
大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)Elisa試劑盒檢測原理：試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。具體來說，使用抗大鼠TRH抗體包被于酶標(biāo)板上，樣品中的大鼠TRH會與包被抗體結(jié)合。接著依次加入生物素化的抗大鼠TRH抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，形成免疫復(fù)合物。加入顯色底物TMB后，在辣根過氧化物酶的催化下，TMB呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。最后，在450 nm波長處測量吸光度（OD值），通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中大鼠TRH的濃度。
大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)Elisa試劑盒基本性能：
靈敏度：靈敏度為0.94 ng/mL。
檢測范圍：檢測范圍為1.56-100 ng/mL。
特異性：可檢測樣本中的大鼠TRH，且與其他類似物無明顯交叉反應(yīng)。
大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)Elisa試劑盒組成：試劑盒通常包含預(yù)包被酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、稀釋液、HRP標(biāo)記抗體、顯色底物、終止液等。
保存條件：試劑盒應(yīng)在2-8°C保存，有效期標(biāo)注于標(biāo)簽上（通常是6個月）。
樣本類型：適用于血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等生物液體。
大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)Elisa試劑盒
使用大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)Elisa試劑盒進(jìn)行實驗時，需要按照以下步驟進(jìn)行：
實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜,37℃反應(yīng)60分鐘。
3.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4.每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液）100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6.依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。
應(yīng)用[4][5]
大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)Elisa試劑盒可以用于EGF、TRH及地塞米松影響未成熟胎肺發(fā)育及妊娠結(jié)局的比較研究
為了進(jìn)一步研究EGF、TRH及GC對胎肺發(fā)育的作用機(jī)制及其對母-胎安全性的影響，本課題通過兔的動物模型比較了EGF、TRH及Dex對胎肺形態(tài)發(fā)育、功能成熟及妊娠結(jié)局的影響，主要結(jié)果如下：一．比較EGF、TRH與地塞米松對未成熟胎肺形態(tài)發(fā)育的作用為了進(jìn)一步了解EGF、TRH與地塞米松對胎肺形態(tài)發(fā)育的促進(jìn)作用是否存在差異及妊娠時間對治療效果的影響情況，本研究利用兔的動物模型，比較了EGF、TRH與地塞米松在妊娠不同時間產(chǎn)前母體用藥對胎肺形態(tài)發(fā)生及肺11型上皮細(xì)胞分化的影響。
大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)Elisa試劑盒結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在妊娠27天，EGF、TRH及地塞米松治療組比對照組肺泡腔更規(guī)則，肺泡間隔更薄。超微結(jié)構(gòu)顯示EGF、TRH及地塞米松治療能明顯增加胎肺11型上皮細(xì)胞的板層體數(shù)量，減少細(xì)胞漿內(nèi)的糖原含量，三者的作用程度無明顯不同。（2）在胎肺發(fā)育的較早期階段（妊娠22～24天），EGF、TRH及地塞米松治療仍可明顯促進(jìn)胎肺肺泡腔樣結(jié)構(gòu)形成，但地塞米松的作用程度強(qiáng)于另外兩種激素。此時；除地塞米松治療組個別細(xì)胞包含少量不成熟的板層體外，EGF、TRH，治療組及對照組胎肺均無板層體出現(xiàn)。各治療組及對照組胎肺細(xì)胞內(nèi)其它；丸胞器發(fā)育也不明顯。相反，糖原含量在各組均非常豐富。
二、EGF、TRH及地塞米松對胎肺SPmRNAs表達(dá)的調(diào)節(jié)目前的研究表明地塞米松在體內(nèi)、體外對SPmRNAs的調(diào)節(jié)受多種因素影響。但EGF和TRH對表面活性物質(zhì)蛋白mRNAs水平有何影響尚未闡明。因此本研究通過比較mH、EGF及地塞米松母體治療對胎肺SP－A、SP－B、SPmRNA水平的影響，進(jìn)一步闡明這些激素和生長因子對胎肺的作用機(jī)制。
大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)Elisa試劑盒結(jié)果發(fā)現(xiàn)：Dex、EGF及TRH在兔妊娠24～26天母體治療可增加SP－BmRNA水平，但三種激素對SP－A和SP－C的mRNA水平無明顯影響；妊娠27天胎肺SP－A、SP－B和SP－CmRNAs己達(dá)到或超過孕兔水平。（2）Dex在妊娠22～24天治療可促進(jìn)SP－BmRNA的表達(dá)，而EGF和TRH的作用不明顯。（3）在妊娠27天，胎肺SP－BmRNA的表達(dá)明顯低于SP－A和SpffiRNAS的表達(dá)。
參考文獻(xiàn)
[1]Congenital alveolar proteinosis caused by a novel mutation of the surfactant protein B gene and misalignment of lung vessels in consanguineous kindred infants[J].M.Wallot;;C.Wagenvoort;;D.deMello;;K.-M.Müller;;J.Floros;;C.Roll.European Journal of Pediatrics,1999(6)
[2]Epidermal growth factor,vascular endothelial growth factor and progesterone promote placental development in rat whole-embryo culture[J].M.Jojovi?;;Friedrich Wolf;;Ulrich Mangold..1998
[3]Surfactant protein-A:New insights into an old protein-part I[J].Ashish R.Kumar;;Jeanne M.Snyder.The Indian Journal of Pediatrics,1998(5)
[4]Growth factor/cytokine secretion by a permanent human endometrial cell line with embryotrophic properties[J].Nina N.Desai;;James M.Goldfarb.Journal of Assisted Reproduction and Genetics,1996(7)
[5]王鳳英.EGF、TRH及地塞米松影響未成熟胎肺發(fā)育及妊娠結(jié)局的比較研究[D].第三軍醫(yī)大學(xué),2002.