介紹
N-芴甲氧羰基-D-天冬氨酸-4-叔丁酯（Fmoc-D-Asp (OtBu)-OH）是一種重要的有機(jī)合成中間體，在多個領(lǐng)域有著廣泛的生物用途。它的外觀為白色到近乎白色結(jié)晶粉末。它是一種受保護(hù)基保護(hù)的氨基酸酯類化合物。
圖一 N-芴甲氧羰基-D-天冬氨酸-4-叔丁酯
合成
將所需氨基酸（1eq）與待Fmoc保護(hù)的游離α-胺溶解在蒸餾水中，使?jié)舛冗_(dá)到0.25M。首先在室溫下劇烈攪拌下，通過滴加濃NaOH（aq）將酸性水溶液中過量的TFA中和至pH=7。接下來，加入Na2CO3（3.8eq，或10%w/v），將溶液的pH值調(diào)節(jié)至約9。另外，將芴甲氧羰基氯（1eq）溶解在二惡烷（0.25M）中，在室溫下攪拌的同時將其滴加到反應(yīng)混合物中。反應(yīng)完成后（2-2.5小時），通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮粗產(chǎn)物并稀釋到蒸餾水中。然后用乙醚洗滌兩次，然后通過加入1M HCl（水溶液）酸化至pH 1-2。將酸化的水相用乙酸乙酯萃取三次，然后用水洗滌合并的有機(jī)物兩次，用鹽水洗滌兩次，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，得到純產(chǎn)物N-芴甲氧羰基-D-天冬氨酸-4-叔丁酯。
圖二 N-芴甲氧羰基-D-天冬氨酸-4-叔丁酯的合成
應(yīng)用
多肽合成領(lǐng)域
N-芴甲氧羰基-D-天冬氨酸-4-叔丁酯是多肽合成中常用的原料。固相多肽合成是一種高效的合成方法，它將氨基酸逐個連接到固相載體上，通過不斷重復(fù)縮合、脫保護(hù)等步驟來合成目標(biāo)多肽。N-芴甲氧羰基-D-天冬氨酸-4-叔丁酯中的Fmoc 基團(tuán)作為一種常用的氨基保護(hù)基，對酸穩(wěn)定，在堿性條件下可以選擇性地脫除，從而使下一個氨基酸能夠與之反應(yīng)形成肽鍵。而叔丁酯（OtBu）則是天冬氨酸側(cè)鏈羧基的保護(hù)基，它可以在特定條件下脫除，避免側(cè)鏈羧基在反應(yīng)過程中發(fā)生不必要的反應(yīng)，確保多肽合成的準(zhǔn)確性和高效性。它可以精確控制多肽中天冬氨酸的位置和修飾方式來合成具有特定功能的多肽。
合成抗體藥物
抗體-藥物偶聯(lián)物是一類新型的抗癌藥物，它通過將細(xì)胞毒性藥物與單克隆抗體通過連接子連接起來，實現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的靶向殺傷。N-芴甲氧羰基-D-天冬氨酸-4-叔丁酯進(jìn)行化學(xué)修飾和衍生化，得到具有特定結(jié)構(gòu)和性能的連接子。這些連接子在血液循環(huán)中保持穩(wěn)定，而在腫瘤細(xì)胞內(nèi)能夠被特定的酶或化學(xué)條件裂解，釋放出細(xì)胞毒性藥物發(fā)揮抗癌作用[2]。
參考文獻(xiàn)
[1]J. W E G ,Kian M ,Sahar S E , et al.Peptidic Inhibitors and a Fluorescent Probe for the Selective Inhibition and Labelling of Factor XIIIa Transglutaminase[J].Molecules,2023,28(4):1634-1634.
[2]Lazarus H L ,Salvadori S ,Balboni G , et al.Stereospecificity of amino acid side chains in deltorphin defines binding to opioid receptors[J].J. Med. Chem.,2002,35(7):1222-1227.