2’-脫氧腺苷-5’-三磷酸二鈉鹽是脫氧腺苷三磷酸鈉鹽形式，簡稱dATP。它是一種核苷酸衍生物，是DNA和RNA的組成部分之一。2’-脫氧腺苷-5’-三磷酸二鈉鹽主要用作生物化學和分子生物學的研究工具，常用于DNA合成和PCR反應中。它在細胞生物學和分子生物學實驗中起著重要作用，如在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后修飾和蛋白質(zhì)合成過程中。

應用研究

1、周毅等人以磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉與2’-脫氧腺苷-5’-三磷酸二鈉鹽的混合溶液為磷標樣，比較了MgSO4,Mg(NO3)2和MgCl2等灰化助劑的作用效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn) ,磷標樣中加入MgSO4經(jīng)500℃灼燒后用0.2mol/L HCl于80℃浸提殘渣0.5h不能使磷全部回收；而MgCl2 、Mg(NO3)2 、MgAc2、CaCl2等助劑，卻都能使灼燒后的磷完全回收。在采用MgSO4高溫灰化法分析海水中的顆粒磷和總磷或有機體中的磷時，應當用MgCl2作為灰化助劑取代MgSO4。盡管Mg(NO3)2也是高效的灰化輔助劑[1]。

2、高義平等人在不添加Mn2+、不調(diào)整其它任何PCR成分的情況下,通過降低2’-脫氧腺苷-5’-三磷酸二鈉鹽濃度的底物不平衡作用,對洋蔥抗菌蛋白基因Ace-AMP1和蘇云金芽胞桿菌毒蛋白(Bt)基因cry1A(c)進行了PCR誘變。結(jié)果表明:隨著2’-脫氧腺苷-5’-三磷酸二鈉鹽濃度的降低,序列變異率和堿基突變率均呈升高趨勢。當dTTP/dCTP/dGTP∶dATP在20∶1-40∶1時,堿基突變率介于1.4%-1.8%之間,序列變異率介于77.8%-100%之間。該方法簡化了常規(guī)易錯PCR誘變中的條件優(yōu)化過程,簡單實用。降低2’-脫氧腺苷-5’-三磷酸二鈉鹽濃度的誘變方法主要引起AT→GC的變異,適用于提高靶基因GC含量的體外誘變[2]。

3、曹佳佳等人以DNA聚合酶η為研究對象,通過計算分子模擬對接的方式,對其可能的小分子抑制劑進行篩選,并對其酶動力學參數(shù)進行測定。結(jié)果顯示:2’-脫氧腺苷-5’-三磷酸二鈉鹽(dATP)對DNA聚合酶η的活性具有抑制效果,使其延伸的相對效率為36%~42%。分子模擬對接和體外實驗結(jié)果表明,相較于2’-脫氧腺苷-5’-三磷酸二鈉鹽(親和力為-26.7 kJ/mol),環(huán)鳥苷酸-腺苷酸(cyclic GMP-AMP,cGAMP)與DNA聚合酶η具有更低的結(jié)合能(親和力為-35.1kJ/mol)。酶動力學參數(shù)測定結(jié)果也表明,相較于2’-脫氧腺苷-5’-三磷酸二鈉鹽,cGAMP具有更強的抑制能力且在濃度為0.5mmol/L時達到最強(相對延伸效率為13%)。因此,本研究篩選獲得了針對DNA聚合酶η的一種潛在的小分子抑制劑。同時,鑒于該蛋白質(zhì)高表達導致細胞對抗腫瘤藥物(DNA損傷劑)的耐受性,這為新型藥物的開發(fā)提供了依據(jù)[3]。

參考文獻

[1]周毅,張福綏,楊紅生,馬錫年.灰化法磷測定中不同灰化助劑的效果比較[J].分析試驗室,2001,20(6):58-61.

[2]高義平,趙和,呂孟雨,孫果忠,楊學舉,王海波.一種降低dATP用量的簡單易錯PCR方法[J].微生物學報,2014,54(1):97-103.

[3]曹佳佳,葉舒邁,趙燁.DNA聚合酶η小分子抑制劑篩選[J].浙江大學學報（農(nóng)業(yè)與生命科學版）,2024,50(1):35-41.