簡(jiǎn)介

血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensin I converting enzyme,ACE)是一種I型跨膜糖蛋白，又名激肽酶I，作為腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angio-tensin system,RAS)和激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)的關(guān)鍵成員，在血壓及心血管功能調(diào)控等方面起著至關(guān)重要的作用。人類(lèi)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶基因位于17號(hào)染色體長(zhǎng)臂端2區(qū)3帶，包含26個(gè)外顯子和25個(gè)內(nèi)含子。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶基因選擇性剪接產(chǎn)生多種轉(zhuǎn)錄變體，分別編碼體細(xì)胞型ACE(somatic ACE,sACE)和睪丸型ACE(testic ACE,tACE)亞型。

作為一種Zn⁺和Cl^-依賴(lài)性的二肽基羧肽酶，血管緊張素轉(zhuǎn)化酶可水解底物肽鏈C端二肽殘基，在RAS系統(tǒng)中可將無(wú)升壓活性的血管緊張素I水解為具有強(qiáng)烈升壓活性的血管緊張素I;同時(shí)，在激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)中將有降壓活性的緩激肽降解為無(wú)活性的片段。此外，血管緊張素轉(zhuǎn)化酶還可水解多種底物如促性腺激素釋放激索、神經(jīng)肽P物質(zhì)、腦啡肽、神經(jīng)降壓素等，因而，血管緊張素轉(zhuǎn)化酶與高血壓、炎癥、動(dòng)脈粥樣硬化、阿爾茨海默病以及糖尿病腎病密切相關(guān)。

背景技術(shù)

酶學(xué)研究和藥物研發(fā)需要大量高純度的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶，目前血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的分離純化方法主要有離子交換層析、凝膠過(guò)濾層析、親和層析和高效液相色譜法等;組織來(lái)源有豬肺、兔肺、豬腎和大鼠血清等。然而血管緊張素轉(zhuǎn)化酶制備工藝煩瑣，分離純化難度高;且商品化血管緊張素轉(zhuǎn)化酶制品價(jià)格昂貴，有時(shí)供貨周期較長(zhǎng)，嚴(yán)重影響了醫(yī)藥研發(fā)進(jìn)度。豬肺作為生豬加工副產(chǎn)品，來(lái)源便捷，價(jià)格低廉，故本研究以豬肺為材料，對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶提取純化工藝進(jìn)行優(yōu)化，為血管緊張素轉(zhuǎn)化酶酶學(xué)研究、心血管類(lèi)新藥研發(fā)提供高純度、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的酶制品。

制備進(jìn)展^[1]

褚輝程等人以豬肺為原料，對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶制備工藝進(jìn)行了優(yōu)化，得到最佳工藝條件:以0.1mol?L^-1BBS(pH8.3)作為血管緊張素轉(zhuǎn)化酶粗提緩沖液，依次經(jīng)硫酸銨二級(jí)鹽析、DEAE-Sepharose FF陰離子交換層析和Superdex 200凝膠過(guò)濾層析獲得電泳純血管緊張素轉(zhuǎn)化酶，比活為0.3020U?mg^-1，純化倍數(shù)為223.54倍。文獻(xiàn)采用DEAE-Sepharose FF陰離子交換層析獲得ACE比活0.1U?mg^-1、純化倍數(shù)29~40倍;要文婷通過(guò)DEAE-Sephadex A-25陰離子交換層析及G-200凝膠過(guò)濾層析獲得血管緊張素轉(zhuǎn)化酶純化倍數(shù)45.2倍;相比之下，本研究的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶酶比活力提高近3倍，純化倍數(shù)提升5倍以上。因而，本工藝操作簡(jiǎn)單，純化效率高，有望為基于 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶靶點(diǎn)的醫(yī)藥研發(fā)提供產(chǎn)業(yè)化酶制品。

參考文獻(xiàn)

[1]褚輝程,陳海英,張文靜,等. 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶制備工藝優(yōu)化研究[J]. 中南藥學(xué),2025,23(2):337-342. DOI:10.7539/j.issn.1672-2981.2025.02.007.