PC-3 人前列腺癌細(xì)胞是前列腺癌研究領(lǐng)域中應(yīng)用最廣泛的細(xì)胞系之一，源于1979年從一位62歲男性轉(zhuǎn)移性前列腺癌患者的骨轉(zhuǎn)移灶中分離建立。作為一種惡性程度較高的腫瘤細(xì)胞模型，其核心生物學(xué)特征與臨床晚期前列腺癌高度契合，為前列腺癌的發(fā)病機(jī)制、藥物研發(fā)及基因治療研究提供了重要工具。
抑癌研究
1、腺病毒作為載體已被廣泛用于腫瘤的基因治療，ING4是生長抑制因子家族中的一個(gè)成員,是一種潛在的抑癌基因。Hui-Cui Yang等人探討了腺病毒介導(dǎo)的人ING4基因(Ad-ING4)對PC-3 人前列腺癌細(xì)胞的體內(nèi)外抑癌效應(yīng)及其分子機(jī)制。方法:將擴(kuò)增的Ad-ING4重組腺病毒感染PC-3 人前列腺癌細(xì)胞,用RT-PCR法檢測ING4在PC-3 人前列腺癌細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄;MTT法檢測ING4基因?qū)C-3 人前列腺癌細(xì)胞增殖的影響;流式細(xì)胞術(shù)和Hoechst33258染色法檢測細(xì)胞凋亡的變化;半定量RT-PCR法檢測ING4基因的表達(dá)對PC-3 人前列腺癌細(xì)胞中的bcl-2、bax、p53和caspase-3凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響。用Ad-ING4重組腺病毒在裸鼠PC-3移植瘤的瘤體內(nèi)注射治療,觀察腫瘤生長變化,15d后處死裸鼠,摘除瘤體,稱瘤重:用免疫組化法檢測瘤組織中Bcl-2、Bax、Caspase-3和CD34蛋白的表達(dá)。結(jié)果:腺病毒介導(dǎo)的人ING4基因在PC-3 人前列腺癌細(xì)胞中成功轉(zhuǎn)錄,明顯抑制PC-3 人前列腺癌細(xì)胞增殖,上調(diào)p53、bax、caspase-3基因表達(dá)和下調(diào)bcl-2基因表達(dá),并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。Ad-ING4重組腺病毒能顯著抑制裸鼠PC-3移植瘤的生長,瘤重的抑制率達(dá)37%,與空病毒載體Ad-GFP組和細(xì)胞對照PBS組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);免疫組化結(jié)果顯示Ad-ING4重組腺病毒能明顯上調(diào)Bax和Caspase-3蛋白的表達(dá)水平,下調(diào)Bcl-2和CD34蛋白的表達(dá)水平。因此，腺病毒介導(dǎo)的ING4基因在體內(nèi)外均可明顯抑制PC-3 人前列腺癌細(xì)胞的生長,誘導(dǎo)其凋亡,其機(jī)制可能是上調(diào)P53、Bax、Caspase-3蛋白和下調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)水平[1]。
2、張蕾蕾等人研究(4R,5S,6S)-4-苯甲酰氧基-6-[(苯甲酰氧基)甲基]-5,6-二羥基-2-環(huán)己烯-1-酮Zeylenone(Zey)對PC-3 人前列腺癌細(xì)胞的生長抑制和誘導(dǎo)凋亡作用。方法采用MTT法觀察Zey對PC-3 人前列腺癌細(xì)胞和正常前列腺基質(zhì)細(xì)胞WPMY-1的增殖抑制作用,應(yīng)用平板克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察Zey對PC-3 人前列腺癌細(xì)胞克隆形成的作用,AO/EB熒光染色觀察細(xì)胞形態(tài)、JC-1染色觀察Zey對細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位的影響,Annexin V-FITC/PI雙染檢測凋亡細(xì)胞比率,Western blot檢測凋亡相關(guān)蛋白Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、Caspase-7和PARP的激活及Bcl-2、Bax、Bid、Bcl-xL蛋白的表達(dá)。結(jié)果Zey可以明顯抑制PC-3 人前列腺癌細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡,而對正常前列腺基質(zhì)細(xì)胞WPMY-1的抑制作用顯著低于PC-3細(xì)胞，Zey抑制PC-3細(xì)胞克隆形成并明顯誘導(dǎo)其凋亡。線粒體膜電位檢測結(jié)果顯示Zey導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位的明顯降低,Western blot檢測結(jié)果表明Caspase-8、Caspase-9、Caspase-7、Caspase-3被激活,PARP和Bid被剪切活化,Bcl-2、Bcl-xL表達(dá)下降,而Bax表達(dá)上調(diào)。因此，Zey可選擇性抑制人非激素依賴性PC-3 人前列腺癌細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡,作用機(jī)制與其對Bcl-2和Caspase家族蛋白的影響,從而誘導(dǎo)PC-3 人前列腺癌細(xì)胞發(fā)生內(nèi)源性和外源性凋亡相關(guān)，Zey有望成為治療前列腺癌的候選藥物[2]。
參考文獻(xiàn)
[1] Hui-Cui Yang, Wei-Hua Sheng, Yu-Feng Xie, et al. Ad-ING4對人前列腺癌細(xì)胞PC-3體內(nèi)外抑癌效應(yīng)的研究[J]. 癌癥,2009,28(11):1149-1157. DOI:10.3321/j.issn:1000-467X.2009.11.006.
[2] 張蕾蕾,李如意,張麗靜,等. Zeylenone抑制人前列腺癌PC-3細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)凋亡作用研究[J]. 中國藥理學(xué)通報(bào),2013,29(6):808-813. DOI:10.3969/j.issn.1001-1978.2013.06.015.