前言

磷脂酰膽堿(大豆)，又稱卵磷脂或膽堿磷脂，是生命活動的基礎物質。它與其它磷脂成分如磷脂酰乙醇肢(PE)、磷脂酸(PA)與肌醇磷脂(PI)等，以混合物形式廣泛存在于動植物和人的細胞膜與卵細胞中。磷脂酰膽堿(大豆)是一種天然的表面活性劑，在食品加工中起乳化、潤濕、分散和脫模等作用。高純度的磷脂酰膽堿(大豆)既可以利用其表面活性作為藥物制劑的輔料，也可加工成功能性食品，具有促進脂肪代謝，防止出現(xiàn)脂肪肝，降低膽固醇，改善血液循環(huán)，防止心血管疾病，促進神經(jīng)傳導，提高大腦記憶力等功能。近年來，磷脂酰膽堿(大豆)的藥用價值越來越凸現(xiàn)，因此對高純度磷脂酰膽堿(大豆)的需求趨旺。但是，目前我國高純度的磷脂酰膽堿(大豆)主要從國外進口，價格昂貴。因此，研究制備高純度的磷脂酰膽堿(大豆)有重要意義。

純天然的磷脂酰膽堿(大豆)主要從豆類及豆類制品中獲取。其中，大豆油脂加工過程中產生的大豆磷脂經(jīng)干燥等簡單處理得到的大豆?jié)饪s磷脂是提取磷脂酰膽堿(大豆)的主要原料。

提純磷脂酰膽堿(大豆)的方法主要有溶劑提取法、超臨界流體萃取法、醇催化精制法、膜分離法和柱層析法等。其中，柱層析法分離效果好，操作簡單，易于實現(xiàn)工業(yè)化，因而成為目前磷脂酰膽堿(大豆)提純的主流方法。層析柱的固定相分為氧化鋁與硅膠兩大類。由于氧化鋁柱不能再生，無法重復使用，硅膠成為最佳的吸附劑。流動相多種多樣，以氟仿/甲醇/水和正己烷/異丙醇/水兩種體系為主，鑒于氧仿毒性大、易造成環(huán)境污染等，宜采用正己烷/異丙醇/水體系。

本文采用硅膠為吸附劑，正己烷/異丙醇/水為流動相的柱層析法，以產品中磷脂酰膽堿(大豆)的純度和回收率為目標，得到了最適的固定相、流動相配比和上載量等主要的工藝參數(shù)。

提純方法^[1]

1、樣品制備

取10g大豆?jié)饪s磷脂于100mL燒杯中，加入40mL流動相，室溫下攪拌至溶解，于冰箱中放置過夜，備用。

2、硅膠柱的制備

取經(jīng)活化的25g粗孔2號硅膠，加入流動相制成漿狀，濕法裝柱，然后用流動相平衡層析柱。

3、磷脂的分離

將制備好的樣品緩緩倒入柱中，進樣完畢后加入流動相洗脫?？刂瓶账魉贋?.382cm·min^-1，分步收集流出液，TLC定性分析，合并富含磷脂酰膽堿(大豆)部分的組分作為層析產品。

柱層析提純大豆磷脂的適宜工藝條件為:在空塔流速為0.382cm·min^-1，進樣濃度為0.25g濃縮磷脂·(mL流動相)^-1的室溫條件下，固定相選用100~200目粗孔2號硅膠，流動相為正己烷:異丙醇:水(1:1:0.16, v/v/v)，最適上載量為0.086g磷脂酰膽堿(大豆)(g硅膠)^-1，產品中磷脂酰膽堿(大豆)純度高達85%。

參考文獻

[1] 張穎穎,楊亦文,任其龍,等. 硅膠柱層析法提純大豆磷脂酰膽堿的研究[J]. 高校化學工程學報,2006,20(5):685-690. DOI:10.3321/j.issn:1003-9015.2006.05.003.