介紹

芴甲氧羰基-(3-甲基戊基酯)-天冬氨酸（Fmoc-Asp(O3MePent)-OH）是一種用于Fmoc固相多肽合成的關(guān)鍵保護(hù)型天冬氨酸衍生物，在天冬氨酸的N端引入芴甲氧羰基（Fmoc）保護(hù)氨基，同時(shí)將側(cè)鏈羧基修飾為3-甲基戊基酯（O3MePent），能有效規(guī)避多肽合成過程中氨基與羧基發(fā)生副反應(yīng)、手性消旋等問題，且Fmoc可通過堿解選擇性脫除。

圖一 芴甲氧羰基-(3-甲基戊基酯)-天冬氨酸

合成

在25°C下，在裝有溫度計(jì)的5L反應(yīng)器中，加入2.5L四氫呋喃、1L水、250g 3-甲基-3-戊醇-磷酸-1-芐酯、25g鈀碳（鈀負(fù)載量為5wt%），在0.5MPa氫氣壓力下，過濾后在25°C下攪拌14h，濾液濃縮除去四氫呋喃，加入1L乙酸乙酯萃取水相兩次，合并有機(jī)相，用飽和氯化鈉洗滌1次，干燥并用無水硫酸鈉濃縮，用乙酸乙酯石油醚重結(jié)晶得到200g 芴甲氧羰基-(3-甲基戊基酯)-天冬氨酸[1]。

圖二 芴甲氧羰基-(3-甲基戊基酯)-天冬氨酸的合成

在干燥氬氣氛圍下，將S-三苯甲基高半胱氨酸（S-Trt-hCys，1.0當(dāng)量）置于干燥反應(yīng)燒瓶中，加入無水二氯甲烷（按每毫摩爾底物加 5-10 mL的比例），室溫?cái)嚢柚恋孜锿耆芙?；隨后加入1.1-1.2當(dāng)量的N,N-二異丙基乙胺（DIPEA）作為縛酸劑，攪拌10-15分鐘混勻；接著緩慢加入溶于少量無水二氯甲烷的1.1-1.2當(dāng)量N-(9H-芴-2-基甲氧基羰氧基) 琥珀酰亞胺（Fmoc-OSu）溶液，室溫持續(xù)攪拌 2-4小時(shí)，通過薄層色譜（展開劑為二氯甲烷：甲醇=15:1，254 nm 紫外顯色）監(jiān)測(cè)至S-Trt-hCys原料斑點(diǎn)消失；反應(yīng)完成后，將反應(yīng)液轉(zhuǎn)入分液漏斗，依次用飽和氯化銨水溶液（洗2次）、飽和氯化鈉水溶液（洗1次）洗滌有機(jī)相，有機(jī)相經(jīng)無水硫酸鈉干燥15分鐘后過濾，濾液減壓濃縮至近干，粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析（洗脫劑梯度為石油醚：乙酸乙酯=3:1至 1:1）純化，收集目標(biāo)組分并濃縮，最終得到白色固體狀的芴甲氧羰基-(3-甲基戊基酯)-天冬氨酸[2]。

圖三 芴甲氧羰基-(3-甲基戊基酯)-天冬氨酸的合成2

參考文獻(xiàn)

[1]Current Patent Assignee: SHANGHAI GLORILADO BIOTECHNOLOGY LTD RESPONSIBILITY - CN114478324, 2023, B

[2]Karlstr?m A, Undén A. A New Protecting Group For Aspartic Acid That Minimizes Piperidine-Catalyzed Aspartimide Formation In Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis[J]. Tetrahedron Letters, 1996, 37(24): 4243-4246.