概述

尼卡巴嗪(Nicarbazin)是一種全球公認的化學合成類抗球蟲老藥，是由等摩爾2-羥基-4,6-二甲基嘧啶(HDP)，4,4'-二硝基二苯基脲(DNC)復合而成的氧化磷酸化解偶聯(lián)劑，目前主要作飼料添加劑用于雞球蟲病的預防，具有高效，低毒，不影響免疫功能，耐藥蟲株產生慢的優(yōu)點。尼卡巴嗪是通過抑制球蟲的無性裂殖生殖而產生抗球蟲作用，對球蟲的活性峰在第二代裂殖體(即球蟲生命周期的第4天)，抗球蟲效果好。由于尼卡巴嗪影響母雞繁殖性，對雛雞有潛在的生長抑制效應，增強雞熱應激等不良作用，以及在禽肉，蛋中殘留而危害人體健康，各國均制定了禽類產品中的尼卡巴嗪最高殘留限量或規(guī)定不得在進出口禽類食品中檢出^[1-3]。尼卡巴嗪屬均二苯酰脲類，常溫常壓下其性狀為黃色粉末，不溶于水^[4]。

制備方法

方法一

將對硝基苯胺，固體光氣，溶劑投入反應釜中，在75～130℃條件下生成4,4'-二硝基二苯基脲，然后加入甲醛，乙酰丙酮，尿素，一種無機酸，在65～70℃反應11小時，用堿調pH值為中性，離心，干燥即可獲得符合質量標準的尼卡巴嗪^[5]。

方法二

以對硝基苯胺和三光氣為原料合成了4,4'-二硝基二苯基脲(DNC)，副產物氯化氫氣體用冷甲醇吸收，產生的溶液用于合成2-羥基-4,6-二甲基嘧啶(HDP)。以尿素和乙酰丙酮為原料，在氯化氫甲醇溶液中合成了HDP。以DNC和HDP的甲醇溶液反應合成了抗球蟲藥尼卡巴嗪。對溶劑，反應溫度和投料比等影響反應的因素進行了優(yōu)化。結果表明，以二甲苯為溶劑，n(對硝基苯胺): n(三光氣) =6:1時，在130℃下反應15h，DNC的收率可達94%；以氯化氫甲醇為溶劑，n(乙酰丙酮): n(尿素) =1.0:1.1，回流下反應5h，HDP的收率為93%以上；以甲醇為溶劑，n(DNC) : n(HDP)=1.0:1.1，室溫反應5h，尼卡巴嗪的總收率可達93%。同時通過并聯(lián)反應，縮短了生產周期，提高了產品質量的穩(wěn)定性^[6]。

分析檢測

實驗建立高效液相色譜法測定尼卡巴嗪的含量，采用WatersX—BridgeC18(150mm×4.6mm,5μm)色譜柱，乙腈-水(用磷酸調pH至3.0)為流動相，梯度洗脫，流速為1.0mL.min^-1。檢測波長0~5min為297nm，5min開始為350nm，柱溫30℃，進樣體積為20μL。2-羥基-4.6-二甲基嘧啶(HDP)的回歸方程為：Y=23452x-456，相關系數r=0.99999，4,4’-二硝基均二苯脲(DNC)的回歸方程為：Y=102388x+5296，相關系數r=0.9999，即HDP在0.29-29.12μg/mL范圍內具有良好的線性，DNC在0.71~70.90μg/mL范圍內具有良好的線性。該方法簡便、準確、靈敏度高、重復性好，可以通過同時測定尼卡巴嗪中HDP和DNC來計算尼卡巴嗪的含量^[7]。

此外，文獻還報道了一種用于檢測尼卡巴嗪的熒光偏振免疫分析方法。通過尼卡巴嗪半抗原與多種異硫氰酸熒光素偶聯(lián)得到多種熒光標記物，得到最佳的熒光標記物和抗體組合，進而建立尼卡巴嗪殘留熒光偏振免疫分析方法。該發(fā)明建立的尼卡巴嗪標準曲線，方法的IC50為28.3ng/mL，線性檢測范圍為10.3～78.1ng/mL，且與其他抗球蟲藥無明顯交叉，特異性好。將其應用于雞肉中尼卡巴嗪的檢測，LOD為24.2μg/kg，回收率為74.2%～85.8%，變異系數為4.0%～8.6%。該方法的靈敏度，回收率及精密度達到檢測的要求。此外，該方法操作簡單，效率高，短時間即可完成檢測，對于尼卡巴嗪在動物性食品中殘留快速篩選檢測以及在畜禽生產中的規(guī)范使用具有重要意義^[8]。

應用

尼卡巴嗪是一種廣譜，高效，性能穩(wěn)定的飼料添加劑，用于防治雞，火雞等禽類球蟲病，對已產生耐藥性的球蟲，仍有顯著療效^[9]。此外，禽類藥物技術領域還報道了一種高活性抗球蟲尼卡巴嗪組合物，包括以下質量百分數的組分：尼卡巴嗪8%~40%，聚卡波非或其鹽0.1%~8%，抗菌肽0.5%~10%，PQQ 0.2%~6%，余量為稀釋劑。該發(fā)明的組合物可延長藥物在腸道的滯留時間，同時，有助于尼卡巴嗪在腸道內分解成更多粒徑超細的4,4'二硝基均二苯脲(DNC)晶體，更易作用于寄生于腸道內的球蟲或被吸收入血，在高效解決球蟲問題的同時，可輔助控制繼發(fā)的梭菌性腸炎問題，通過對球蟲和梭菌這兩種養(yǎng)雞中破壞腸道最重要的致病因素的控制，從而更有效維護家禽腸道健全^[9]。

參考文獻

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