介紹

FMOC-N-ME-CYS(TRT)-OH的中文名稱為N-Fmoc-N-甲基-S-三苯甲基-L-半胱氨酸），它是一種經過雙重保護的L-半胱氨酸衍生物，分子式為C??H??NO?S，外觀為白色至類白色粉末或晶體，其分子結構中，α-氨基同時被9-芴甲氧羰基（Fmoc）和甲基保護，巰基側鏈則被三苯甲基（Trt）保護，是Fmoc固相肽合成（SPPS）中的關鍵化合物，專用于向多肽鏈中引入N-甲基半胱氨酸殘基，而N-甲基化修飾能夠顯著提升多肽的代謝穩(wěn)定性、生物利用度以及細胞膜穿透能力。

圖一 FMOC-N-ME-CYS(TRT)-OH

合成

以Alloc-N-Me-Cys(Trt)-OH為起始原料，在二氯甲烷中加入四(三苯基膦)鈀和苯基硅烷，室溫攪拌30分鐘脫除Alloc保護基，濃縮后直接用于下一步；將所得N-Me-Cys(Trt)-OH溶于二氧六環(huán)/水(1:1)混合溶劑，加入2%碳酸鈉水溶液冷卻至4℃，緩慢滴加Fmoc-OSu的二氧六環(huán)溶液，4℃反應2小時后升至室溫繼續(xù)反應16小時，維持pH在9-10之間；反應結束后減壓除去二氧六環(huán)，水相用1N鹽酸酸化至pH3，乙酸乙酯萃取3次，合并有機相經飽和食鹽水洗滌、無水硫酸鎂干燥后濃縮，最后通過硅膠柱色譜（洗脫劑：40%乙酸乙酯/正己烷+1%乙酸）純化，得到白色固體產物，總收率89%[1]。

圖二 FMOC-N-ME-CYS(TRT)-OH的合成

將C端未保護的H-N-Me-Cys(Trt)-OH溶于無水乙腈/甲苯混合溶劑，加入N,O-雙(三甲基硅基)乙酰胺(BSA)室溫攪拌，原位生成O-三甲基硅基保護的羧基中間體以避免副反應；冷卻至0℃后緩慢滴加Fmoc氯甲酸酯(Fmoc-OCOCl)的甲苯溶液，升至30℃反應完成；用1M KHSO?水溶液淬滅并脫除硅基保護，分離有機相后經正庚烷洗滌除雜、飽和食鹽水洗滌、無水硫酸鎂干燥并濃縮，無需柱色譜即可得到高純度白色固體產物，收率可達90%以上[2]。

圖三 FMOC-N-ME-CYS(TRT)-OH的合成2

參考文獻

[1]A G S ,Dongyeol L .Solid-Phase Synthesis of Triostin A Using a Symmetrical Bis(diphenylmethyl) Linker System.[J].The Journal of organic chemistry,2015,80(15):7486-94.DOI:10.1021/acs.joc.5b01055.

[2]KURASAKI H, NAGAYA A, KOBAYASHI Y, et al. Isostearyl Mixed Anhydrides for the Preparation of N-Methylated Peptides Using C-Terminally Unprotected N-Methylamino Acids[J]. Org. Lett., 2020, 22(20): 8039-8043.