背景及概述^[1][2]

刺梨為薔薇科植物繅絲花ＲoseroxburghiiTratt的果實，廣泛分布于暖溫帶及亞熱帶地區(qū)，在我國主要分布在四川、云南和貴州三省，其中又以貴州野生與栽培資源最為豐富。刺梨苷具有消食健脾，收斂止瀉的功效，主要用于治療積食腹脹，泄瀉等疾病。

研究表明，刺梨苷和黃酮類成分為刺梨的主要活性物質，并在增強免疫力、延緩衰老、抗動脈粥樣硬化、健胃消食等方面均具有較好的活性。作為藥食兩用植物提取物，1994版、2003版《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》和2004年衛(wèi)生部食品新資源品種17號公告先后收錄該品種，目前在食品、保健用品、醫(yī)藥領域廣泛應用。但其質量控制方法仍處于空白，尤其是在醫(yī)藥、保健用品應用領域。刺梨苷可溶于水,在甲醇中易溶解。

應用^[3]

有研究顯示，刺梨苷能夠對急性高原缺氧起到較好效果。但當前針對刺梨苷治療急性高原缺氧的研究并不多，因此無法準確闡明其作用機理。而研究即通過大鼠實驗分析了刺梨苷在治療急性高原缺氧方面的效果。通過研究顯示，觀察組大鼠的腦含水量明顯低于對照組。這說明使用刺梨苷處理能夠較好的避免急性高原缺氧度腦部組織造成的危害。對其進行分析后顯示，其起效機制主要是因為刺梨苷的抗氧化作用。

刺梨苷本身屬于此例中的五環(huán)三萜類物質，有著較強的抗氧化作用?？汕宄C體內部自由基并且康脂質氧化的效果。尤其是在以往的研究中顯示，刺梨苷能夠對抑制衰老小鼠單胺氧化酶的活性，從而改善機體內部的抗氧化水平。而在急性高原缺氧發(fā)生后，機體內部會出現較嚴重的氧化作用，尤其是腦缺氧更是會對腦組織造成較大危害。而在此時若使用刺梨苷治療，則能夠起到較強的抗氧化效果。

使用刺梨苷對急性高原缺氧大鼠處理后，其體內血清丙二醛可明顯降低，并且血清超氧化物歧化酶水平可明顯提升。也可說明刺梨苷在治療急性高原缺氧方面的效果。綜上所述，使用刺梨苷治療急性高原缺氧可取得較好效果，通過抗氧化作用能夠明顯改善對腦部組織的傷害，并可降低血清丙二醛水平，提升血清超氧化物歧化酶含量，在臨床治療時有較高使用價值。

細胞缺氧損傷時，線粒體功能異常，氧化呼吸鏈受損，電子傳遞阻斷，ATP產生減 少。琥珀酸脫氫酶是琥珀酸氧化呼吸鏈里重要的復合酶之一，可催化琥珀酸脫氫生成延胡 索酸，從而使FAD接受兩個氫原子生成FADH2，然后再將氫傳遞給COQ，生成COQH2，繼續(xù)呼吸鏈 的電子傳遞過程。故琥珀酸脫氫酶的活性，可以反映細胞缺氧損傷的程度。

MTT的實驗原理 就是利用琥珀酸脫氫酶可以催化噻唑蘭(MTT)生成紫紅色不溶性有色產物的特性，通過吸 光度值可間接反映細胞活性。實驗檢測結果顯示：EA.hy926內皮細胞缺氧損傷2h，與正常 對照組比較，缺氧模型組吸光度值顯著降低，細胞代謝活力降低，培養(yǎng)液中LDH活性顯著升 高，表明細胞膜受缺氧損傷，胞內LDH外漏增加。

刺梨苷干預組，與缺氧損傷模型組比較吸光 度值均增加，培養(yǎng)液中LDH活性顯著降低，表明刺梨苷能對抗缺氧對內皮細胞琥珀酸脫氫酶 活性的損害，維持缺氧損傷細胞的呼吸功能；缺氧導致細胞膜損傷時，細胞內LDH將外漏，導 致培養(yǎng)基中LDH活性升高，本試驗顯示3個劑量刺梨苷組與模型組相比培養(yǎng)基中LDH活性均 明顯降低，表明刺梨苷可在急性缺氧條件下，保持內皮細胞膜的完整性。

SOD,CAT和GSH反映了細胞清除自由基的能力，MDA則反映了細胞膜脂質過氧化損 傷程度，缺氧損傷模型組EA.hy926內皮細胞與正常對照組比較，SOD,CAT活性和GSH含量下 降，MDA含量顯著增加；3個劑量刺梨苷干預組均可提高細胞內SOD,CAT活性和GSH含量，減少 MDA的產生，表明刺梨苷可通過增強內皮細胞清除自由基的能力，對抗缺氧導致的細胞膜氧化損傷。刺梨苷具有鎮(zhèn)痛、抗炎和抗脂質過氧化的作用。

制備^[2]

提取方法：

取刺梨藥材粉末約2.5g,精密稱定,置250ml圓底燒瓶中,加甲醇100ml,水浴回流,過濾，殘渣用40ml甲醇洗滌4次,每次10ml,合并濾液并濃縮至約10ml,加于中性氧化鋁柱(100~120目,10g,內徑10~15mm1),用90%甲醇100ml洗脫,收集洗脫液,濃縮至干,殘渣用甲醇溶解后轉移至10ml量瓶中,并稀釋至刻度,搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過,取續(xù)濾液,即得。同時考察了不同回流時間提取的實驗結果,最后確定提取方法為用甲醇作溶媒,回流提取1h,再通過中性氧化鋁柱，干燥得到刺梨苷。

主要參考資料

[1] 袁海龍, 劉峰群, 趙艷玲, & 蔡光明. (2003). 蕨麻藥材中刺梨苷含量的hplc測定. 中藥材, 26(4), 261-262.

[2] 李齊激, 南瑩, 楊艷, 王道平, & 楊小生. (2016). Hplc法測定藥食兩用植物刺梨中刺梨苷的含量. 中國民族民間醫(yī)藥, 25(9), 22-23.

[3] 丁晨晨, 劉明皓, 趙玉娟, 賈虎, 王赟, & 趙天一等. (2017). 刺梨苷抗大鼠急性高原缺氧作用研究. 臨床醫(yī)藥文獻電子雜志, 4(96).