介紹

車葉草苷(asperuloside，ASP)是一種環(huán)烯醚萜苷，主要從白花蛇舌草的草藥中提取，具有抗腫瘤，抗氧化和抗炎的廣泛藥理作用。近年來研究表明ASP能夠通過多種途徑，對人乳腺癌、白血病和口腔癌等細(xì)胞具有毒性作用，進而發(fā)揮良好的抗癌活性，可作為潛在的抗癌化合物使用。

圖一 車葉草苷

作用機制

MTT分析顯示，車葉草苷對DU145細(xì)胞的活力具有明顯的抑制作用，且具有濃度依賴性，其24 h 半數(shù)致死量為643.57 μg/mL(圖1)。據(jù)此，后續(xù)實驗選取160 μg/mL和640 μg/mL分別為 L-ASP和H-ASP組實驗濃度。

圖二 不同濃度車葉草苷對DU145細(xì)胞活力影響的MTT法分析

qRT-PCR檢測顯示：低濃度車葉草苷和高濃度ASP處理均能使DU145細(xì)胞中miR-589-5p表達水平顯著升高，PGK1 mRNA表達水平顯著降低；在低濃度ASP或高濃度ASP處理的同時轉(zhuǎn)染anti-miR-589-5p，ASP升高miR-589-5p表達水平和降低PGK1 mRNA表達水平的作用明顯減弱(圖三)。

圖三 車葉草苷和miR-589-5p抑制劑對DU145細(xì)胞中miR-589-5p和PGK1 mRNA表達影響的qRT-PCR檢測

miR-589-5p抑制劑減弱車葉草苷對DU145細(xì)胞增殖的抑制

MTT分析和平板克隆法實驗顯示，低濃度車葉草苷和高濃度ASP處理均能顯著降低DU145細(xì)胞的活力和克隆形成數(shù)；轉(zhuǎn)染miR-589-5p抑制劑能明顯減弱低濃度ASP或高濃度ASP處理所致的DU145細(xì)胞增殖抑制(圖四)。

圖四 車葉草苷和miR-589-5p抑制劑對DU145細(xì)胞增殖的影響

miR-589-5p抑制劑減弱車葉草苷對DU145細(xì)胞遷移和侵襲的抑制

劃痕實驗分析顯示，與Control組相比，低含量車葉草苷組、高含量車葉草苷組DU145細(xì)胞的劃痕愈合率降低；與H-ASP組或H-ASP+anti-NC組相比，H-ASP+anti-miR組DU145細(xì)胞的劃痕愈合率升高(圖5)。Transwell分析顯示，與Control組相比，L-ASP組、H-ASP組DU145細(xì)胞的侵襲數(shù)降低；與H-ASP組或H-ASP+anti-NC組相比，H-ASP+anti-miR-589-5p組DU145細(xì)胞的侵襲數(shù)升高(圖五)[1]。

圖五 車葉草苷和miR-589-5p抑制劑對DU145細(xì)胞遷移的影響

參考文獻

[1]張祿陽,趙濤.車葉草苷通過miR-589-5p抑制PGK1表達和前列腺癌細(xì)胞增殖遷移和侵襲[J].中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志,2025,34(04):358-366.DOI:10.16705/j.cnki.1004-1850.2025.04.008.