乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一,骨轉移是晚期乳腺癌患者常見的轉移部位,嚴重影響患者的生存質量及預后[1]。在探索骨轉移機制的過程中,細胞因子白介素11(IL-11)逐漸成為研究熱點。IL-11作為IL-6家族成員之一,具有較強的抗炎作用,并可誘導骨髓祖細胞轉變成破骨細胞,從而在溶骨性骨轉移中發(fā)揮關鍵作用[1]。要準確檢測生物樣本中IL-11的表達水平,人白介素11(IL-11)Elisa試劑盒是最核心的技術工具。該試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)的雙抗體夾心法原理,能夠對血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清及組織勻漿等樣本中的IL-11蛋白進行精確定量。

人白介素11(IL-11)Elisa試劑盒在乳腺癌研究中的應用實例
檢測乳腺癌患者血清IL-11表達水平
采用人白介素11(IL-11)Elisa試劑盒檢測了108例乳腺癌患者、30例乳腺良性腫瘤患者及30例健康體檢者血清中的IL-11水平。嚴格按照試劑盒說明書操作,采集空腹外周靜脈血3mL,室溫放置30min待血液凝固后,3000r/min離心5min,取上層血清置于-20℃冰箱備檢。以標準品水平作為橫坐標,所對應的吸光度值為縱坐標,繪制標準曲線,在標準曲線上換算血清標本吸光度值所對應的IL-11濃度[1]。
結果顯示,乳腺癌組血清IL-11水平顯著高于乳腺良性腫瘤組和健康對照組,而乳腺良性腫瘤組與對照組之間差異無統(tǒng)計學意義[1]。這一結果表明,人白介素11(IL-11)Elisa試劑盒能夠有效區(qū)分乳腺癌患者與良性病變及健康人群,提示IL-11可作為乳腺癌輔助診斷的潛在血清學標志物。
評估IL-11與乳腺癌骨轉移的關系
通過人白介素11(IL-11)Elisa試劑盒檢測不同骨轉移分級的乳腺癌患者血清IL-11水平發(fā)現(xiàn),骨轉移患者的IL-11水平均顯著高于無骨轉移患者。該研究進一步證實,隨著骨轉移分級的增加,人白介素11(IL-11)Elisa試劑盒檢測到的血清IL-11水平也隨之升高,提示IL-11水平與骨轉移嚴重程度呈正相關,對于骨轉移的早期診斷和病情評估具有重要價值[1]。
分析IL-11與CTGF及STAT3的相關性
另外利用人白介素11(IL-11)Elisa試劑盒對樣本定量檢測數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn),IL-11與CTGF可能存在協(xié)同作用,共同改變骨微環(huán)境,加速溶骨細胞發(fā)育,誘發(fā)溶骨性骨損傷[1]。從組織層面研究了IL-11與信號轉導和轉錄激活因子3(STAT3)的關系,通過相關數(shù)據(jù)分析證實了IL-11可能通過激活STAT3信號通路參與乳腺癌發(fā)生發(fā)展的假設[2]。
檢測原理
人白介素11(IL-11)Elisa試劑盒的核心原理是雙抗體夾心法。試劑盒提供的微孔板預先包被了特異性抗人IL-11的捕獲抗體。檢測時,加入待測樣本、標準品和生物素化的檢測抗體,樣本中的IL-11被捕獲抗體結合,同時檢測抗體也結合到IL-11的另一表位,形成“捕獲抗體-抗原-檢測抗體”夾心復合物。隨后加入鏈霉親和素標記的辣根過氧化物酶(HRP),催化顯色底物(如TMB)產(chǎn)生顏色反應,顏色深淺與樣本中IL-11濃度成正比。最后用酶標儀在450nm波長處測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算出IL-11的精確濃度。
試劑盒的優(yōu)勢
人白介素11(IL-11)Elisa試劑盒具有以下突出優(yōu)勢:①靈敏度高,檢測下限可達皮克(pg)級別;②特異性強,抗體與IL-11高度特異性結合,無明顯交叉反應;③操作相對簡便,可同時檢測大批量樣本;④定量準確,結果可重復性好;⑤適用于多種樣本類型,包括血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清及組織勻漿等。
參考文獻
[1] 尚慶毅, 曹世通, 成昌宏, 等. 乳腺癌患者IL-11、CTGF的表達水平及其與骨轉移的相關性[J]. 國際檢驗醫(yī)學雜志, 2017, 38(19): 2712-2714.
[2] 李玉柱, 韓龍才, 張華, 等. 乳腺癌中白介素-11、信號轉導和轉錄激活因子3的表達及相關性[J]. 實用預防醫(yī)學, 2018, 25(6):783-786 .