井岡霉素,又稱N-[(1S)-(1,4,6/5)-3-羥甲基4,5,6-三羥基-2-環(huán)己烯基]、有效霉素、百里達(dá)斯等,由6種氨基葡萄糖化合物(稱組合A、B、C、D、E、E)組成,其中A、B、E、F約占60%,主要活性成分為A。它們是井岡霉素產(chǎn)生菌的二級(jí)代謝產(chǎn)物,井岡霉素產(chǎn)生菌原放線菌鏈霉力屬吸水類群。

井岡霉素為內(nèi)吸性殺菌劑。主要防治水稻紋枯病,持效期15~20d,耐雨水沖刷。還可防治小粒菌核病,稻曲病,玉米大斑病,玉米穗腐病,玉米、豆類立枯病、白組病,人參、棉花、蔬菜立枯病。為得到高純的產(chǎn)品并對(duì)其生產(chǎn)過程進(jìn)行控制,需要對(duì)井岡霉素的原料藥進(jìn)行純化,該研究采用了重結(jié)晶法純化井岡霉素,且用硫酸-苯酚法對(duì)其含量進(jìn)行了分析。

純化方法

重結(jié)晶。在錐形瓶中加入井岡霉素原藥和一定量的溶劑甲醇,加熱至完全溶解,并用折疊濾紙過濾至燒杯中。加入乙酸乙酯至沉淀不再析出,用布氏漏斗抽濾,濾液沖洗錐形瓶。

將濾餅置于真空干燥箱(50℃)中干燥1h左右,再置于裝有無水CaCl2的棕色干燥器中干燥30min,即得井岡霉素試樣[1]。

多糖測定原理

苯酚-硫酸比色法測定多糖含量是由Dubois等提出的。多糖或寡糖被濃硫酸在適當(dāng)高溫下水解,產(chǎn)生單糖,并迅速脫水成糠醛衍生物,該衍生物在強(qiáng)酸條件下與苯酚起顯色反應(yīng),在波長490nm處,其吸光度A值與糖濃度C呈線性關(guān)系,因此可用比色法測定井岡霉素的含量。

結(jié)果

通過對(duì)比試驗(yàn)確定了硫酸-苯酚法測定井岡霉素的最佳條件:對(duì)照品為無水葡萄糖;苯酚用量5%;苯酚溶液1.0ml,濃硫酸用量5.0ml,反應(yīng)后靜置20min,檢測波長490nm,標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)R為0.9939。在此最佳條件下測定井岡霉素的含量操作簡單,準(zhǔn)確度高,可靠性強(qiáng)。該法具有簡單、快速、無需鄉(xiāng)糖純品和貴控制重儀器等優(yōu)點(diǎn),且對(duì)水溶性樣祥品和非水溶性樣品均可測定[1]。

參考文獻(xiàn)

[1] 曹暉,王紹云. 井岡霉素的提純和含量測定研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(6):3359-3361. DOI:10.3969/j.issn.0517-6611.2011.06.082.