渥曼青霉素(wortmannin,WM)是一種真菌代謝產(chǎn)物,其通過與磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidyli-nositol-3 kinase,PI3K)的催化亞單位pll0結(jié)合，非競爭性和不可逆地抑制PI3K激酶活性,從而阻斷PI3K/Akt信號通路,是PI3K的特異性抑制劑。渥曼青霉素對多種進(jìn)展期腫瘤如結(jié)腸癌、肺癌、胃癌、乳腺癌等都有治療作用,尤其是胃癌的預(yù)防和治療方面具有重大的應(yīng)用前景。
活性研究
王曉南等人研究PI3K/Akt抑制劑渥曼青霉素對白血病細(xì)胞增殖和凋亡的影響,并探討其可能的作用機(jī)制。方法:以不同濃度的渥曼青霉素作用于人類髓細(xì)胞白血病細(xì)胞K562,采用MTT法檢測細(xì)胞增殖活性,單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)檢測細(xì)胞DNA損傷形成的"彗星"樣拖尾現(xiàn)象,Annexin V-FITC/PI雙標(biāo)法檢測細(xì)胞凋亡,Western blotting、RT-PCR檢測渥曼青霉素作用K562細(xì)胞后總Akt和磷酸化Akt以及NF-κB基因及蛋白表達(dá)水平的變化。結(jié)果:渥曼青霉素以時間-劑量依賴性方式抑制K562細(xì)胞的增殖,其24h的IC50是25nmol/L.渥曼青霉素誘導(dǎo)K562細(xì)胞發(fā)生凋亡,其作用呈明顯劑量依賴性增強(qiáng).渥曼青霉素作用后K562細(xì)胞DNA鏈斷裂,呈現(xiàn)"彗星"拖尾現(xiàn)象,其尾長與拖尾率顯著高于對照組(P<0.01)。渥曼青霉素能同時在蛋白和基因水平,以劑量依賴性方式抑制磷酸化Akt以及NF-κB表達(dá),但對總Akt蛋白沒有明顯影響。結(jié)論:渥曼青霉素以時間和劑量依賴方式明顯抑制K562細(xì)胞的增殖及誘導(dǎo)其凋亡,其機(jī)制可能與其下調(diào)磷酸化PI3K/Akt信號通路以及NF-κB蛋白表達(dá)有關(guān)[1]。
劉杉珊等人探討了氟尿嘧啶(Fu)聯(lián)合渥曼青霉素(wortmannin)對人野生型及突變型p53結(jié)腸癌細(xì)胞株(HCT-116和SW-480)增殖和凋亡的影響,闡明p53對人結(jié)腸癌細(xì)胞增殖和凋亡的作用。方法:將處于對數(shù)生長期的HCT-116和SW-480人結(jié)腸癌細(xì)胞株分為空白對照組、氟尿嘧啶組、氟尿嘧啶聯(lián)合渥曼青霉素組和氟尿嘧啶聯(lián)合渥曼青霉素及p53抑制劑(PFT-α)組,分別給予氟尿嘧啶、渥曼青霉素及PFT-α,采用噻唑鹽比色法(MTT)、Annexin V-FITC流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測各組細(xì)胞12、24和48h的存活率和細(xì)胞凋亡率。結(jié)果:與氟尿嘧啶組比較,渥曼青霉素聯(lián)合氟尿嘧啶組HCT-116和SW-480細(xì)胞存活率顯著降低(P＜0.05),并隨時間延長而逐漸降低；流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測,各組細(xì)胞凋亡率隨時間的延長而增高(P＜0.05)；與渥曼青霉素聯(lián)合氟尿嘧啶組比較,氟尿嘧啶聯(lián)合渥曼青霉素及PFT-α組HCT-116細(xì)胞存活率及細(xì)胞凋亡率無明顯變化(P＞0.05),而SW-480細(xì)胞48h的存活率顯著降低(P＜0.05),凋亡率顯著增高(P＜0.05)。結(jié)論:渥曼青霉素能顯著增強(qiáng)氟尿嘧啶對人結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的抑制作用并促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡；抑制p53表達(dá)能進(jìn)一步增強(qiáng)渥曼青霉素聯(lián)合氟尿嘧啶對p53突變型SW-480細(xì)胞增殖的抑制作用并促進(jìn)細(xì)胞凋亡[2]。
參考文獻(xiàn)
[1] 王曉南,吳青,張連生,等. PI3K/Akt抑制劑渥曼青霉素對白血病細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J]. 中國腫瘤生物治療雜志,2010,17(1):82-87. DOI:10.3872/j.issn.1007-385X.2010.01.016.
[2] 劉杉珊,楊巖,焦本蒸,等. 氟尿嘧啶聯(lián)合渥曼青霉素對人結(jié)腸癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J]. 吉林大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版）,2013,39(1):29-33. DOI:10.7694/jldxyxb20130108.