DF培養(yǎng)基是根際促生菌（PGPR）篩選專用基礎(chǔ)培養(yǎng)基，以硫酸銨為唯一氮源；配套ADF培養(yǎng)基（將硫酸銨替換為ACC）配對使用，用于定性定量檢測細菌ACC脫氨酶活性。

應(yīng)用研究

許多的植物內(nèi)生菌不僅可以促進宿主植物的生長，還能提高宿主的種子萌發(fā)率、根長及根的表面積。對其研究，可為利用植物內(nèi)生促生菌提供重要理論支持。本研究采用多相分類方法對從采自內(nèi)蒙古土默特右旗的細葉鹽爪爪(Kalidiumcuspidatum)的莖中分離的一株命名為HU2P27T菌株進行分類鑒定，菌株HU2P27T可以產(chǎn)生吲哚乙酸（IAA），在DF培養(yǎng)基中培養(yǎng)72h時，可以產(chǎn)9.403±0.312mg/LIAA；菌株HU2P27T可以分泌鐵載體[1]。

目前常用的動物肌腱研究模型(比如兔,羅曼雞等)的培養(yǎng)方法存在周期長,細胞獲取量少等不足,往往成為制約肌腱組織工程實驗研究進程的瓶頸。王治等人希望建立SD大鼠鼠尾肌腱細胞培養(yǎng)流程,以期用較短時間獲取大量種子細胞,為更高的工程化肌腱構(gòu)造研究創(chuàng)造模型構(gòu)建條件。設(shè)計、時間及地點:對比觀察,于2006-02/11在四川大學(xué)生物治療國家重點實驗室干細胞與組織工程研究室完成。材料:7～10dSD大鼠2只用于獲取鼠尾腱細胞;第4代人包皮成纖維細胞由四川大學(xué)華西醫(yī)院干細胞與組織工程研究室提供。方法:選用SD乳鼠,無菌條件下抽取尾腱,體積分數(shù)為10%的小牛血清+DF培養(yǎng)基懸浮組織塊培養(yǎng)法獲得鼠尾肌腱原代細胞,將第3代細胞與人包皮成纖維細胞為對照,行Ⅰ,Ⅲ型膠原免疫細胞化學(xué)染色,染色結(jié)果用image-pro plus 5.02行吸光度測量,并做統(tǒng)計分析。主要觀察指標:SD大鼠尾腱細胞免疫細胞化學(xué)染色結(jié)果及染色吸光度測量[2]。

黃天姿等人為篩選能產(chǎn)生1-氨基環(huán)丙烷-1-羧基(ACC)脫氨酶的大豆植物根際細菌,從大豆根際土壤中分離得到10株大豆根際細菌,其中5株在DF培養(yǎng)基和ADF培養(yǎng)基中能以ACC作為唯一氮源生長。通過16S rDNA測序及生理生化實驗證實,H1為地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis),H2為蘇云金桿菌(Bacillus thuringiensis),H8為貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis),H9為芽孢桿菌(Bacillus sp.),H10為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)。ACC脫氨酶活力測定數(shù)據(jù)表明,芽孢桿菌(Bacillus sp.)的ACC脫氨酶活性最大,為0.0978U·mg^-1[3]。

參考文獻

[1] 王海濤. 一株植物內(nèi)生水芽孢桿菌新種的分類鑒定和基因組分析[D]. 內(nèi)蒙古:內(nèi)蒙古大學(xué),2022.

[2] 王治,陳曦,秦廷武,等. 組織工程肌腱細胞研究模型的構(gòu)建:SD大鼠尾腱細胞可行嗎?[J]. 中國組織工程研究與臨床康復(fù),2009,13(46):9011-9014. DOI:10.3969/j.issn.1673-8225.2009.46.001.

[3] 黃天姿,李同祥,湯薇,等. 大豆根際土壤產(chǎn)ACC脫氨酶細菌的分離與鑒定[J]. 南方農(nóng)業(yè),2022,16(6):1-3. DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2022.06.001.