前言
阿莫地喹(amodiaquine)為4-氨基喹啉衍生物，通過抑制裂殖體 DNA復制與轉(zhuǎn)錄過程,而呈現(xiàn)強烈地抗瘧作用,可殺滅紅細胞內(nèi)各發(fā)育期階段的瘧原蟲，無明顯不良反應，孕婦及肝腎功能損害者無禁忌,臨床主要用于已發(fā)作的瘧疾，也可預防其發(fā)作，并可根治惡性瘧。此外還可以用于阿米巴肝膿腫、肺吸蟲病、肝吸蟲病以及某些自身免疫性疾病。其人體內(nèi)血藥濃度的檢測方法目前國內(nèi)未見公開文獻報道,而國外報道檢測方法又過于復雜。
方法與結(jié)果
1、標準溶液配制
精密稱取阿莫地喹10mg,置于10mL量瓶中,加甲醇溶解并定容,搖勻，即得標準品儲備液,用時稀釋成標準工作液。精密稱取羥氯喹1mg溶于100mL甲醇中,配制成10mg/L內(nèi)標溶液。
2、色譜條件
色譜柱:Hypersil Silica C18(4.6mmX150mm,5um);流動相:甲醇-水-三乙胺-磷酸(21:77.5:1:0.5,v/v);流速:1.0mL?min-1;檢測波長:294nm;柱溫:40℃;進樣量:50uL。
3、血漿樣品處理
-20℃冷凍保存的血漿在暗處自然溶化，3000r·min-1離心5min,取血1.0mL放入10mL離心管中，加入30uL內(nèi)標(10mg?L-1)和0.2 mL氨水,加入4.0mL乙醚,渦旋振蕩3min,離心5min(5000r?min-1),取上層乙醚3mL轉(zhuǎn)移至另一試管中,氮氣20℃水浴吹干。殘渣加流動相120uL,渦旋振蕩1min,離心1min(3000r·min-1)即得,進樣量50ul。
4、色譜行為
阿莫地喹和羥氯喹的保留時間分別為8.63min和5.86min,二者分離良好,血漿中雜質(zhì)對其無干擾。測得的空白血漿、標準品以及血漿樣品色譜圖見下圖[1]。
5、標準曲線的制備
分別取空白血漿1mL,精密加入阿莫地喹標準溶液,配制成濃度為5,10,25,50,100,200,400,600,800,1000mg?L-1的標準血漿樣品，加入內(nèi)標羥氯喹溶液30uL(10mg/L),按“3”項下從“加入30uL內(nèi)標”起對樣品進行處理、測定。以阿莫地喹與羥氯喹面積比值(Y)和阿莫地喹濃度(X)進行線形回歸,得回歸方程為Y=3.3236X102X+1.1222,r=0.9998,結(jié)果阿莫地喹在5~1000ug/L范圍內(nèi)線性良好,最低檢測限為5ug/L(S/N>3)。
參考文獻
[1] 周于祿,劉世坤,張杰,等. 高效液相色譜法測定人血漿中阿莫地喹含量[J]. 中國醫(yī)院藥學雜志,2006,26(6):704-706. DOI:10.3321/j.issn:1001-5213.2006.06.023.