介紹

精胺四鹽酸鹽是生物內(nèi)源性多胺精胺的四鹽酸鹽形式，又被稱為三亞乙基四胺四鹽酸鹽，具有較強(qiáng)吸濕性，易溶于水、微溶于乙醇，不溶于乙醚、氯仿等多數(shù)有機(jī)溶劑，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，分子內(nèi)多個(gè)質(zhì)子化氨基可通過靜電相互作用結(jié)合帶負(fù)電荷的核酸與蛋白質(zhì)。它是生化與分子生物學(xué)研究的常用試劑，可用于沉淀純化核酸、穩(wěn)定DNA/RNA空間結(jié)構(gòu)、提取組蛋白與染色質(zhì)組分，也可作為細(xì)胞培養(yǎng)添加劑調(diào)控細(xì)胞增殖與膜完整性。同時(shí)在多胺生理功能研究、抗腫瘤機(jī)制研究及醫(yī)藥中間體合成中也有應(yīng)用。

圖一 精胺四鹽酸鹽

精制步驟

在步驟I中，通過在水和TBME的存在下攪拌，將三亞乙基四胺(標(biāo)稱量為125kg)裝入反應(yīng)器中，然后裝入TBME(185±5kg)。添加水(約28kg)，攪動≥15分鐘，同時(shí)將溫度保持在≤30℃。如果需要，在25?35 ℃下攪拌的同時(shí)，在溶液中接種三亞乙基四胺水合物(約0.1kg)，以促進(jìn)結(jié)晶。在25?35℃下添加異丙醇(64±1kg)。將懸浮液在30?40℃加熱≥15分鐘，然后在≥90分鐘的時(shí)間內(nèi)緩慢冷卻至15?25 ℃。將懸浮液冷卻至?5?5℃，并攪動≥30分鐘。將產(chǎn)品過濾并離心。然后，提取樣品進(jìn)行分析(GC測定)并確定雜質(zhì)。如果樣品足夠純，則將濕的TETA水合物裝入干燥機(jī)中，并在≤25℃的溫度下干燥，直到滿足下一步驟規(guī)定的要求。將三亞乙基四胺(TETA)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的三亞乙基四胺水合物(TETA水合物)。

步驟Ⅱ生產(chǎn)粗制三亞乙基四胺四鹽酸鹽(粗制TETA .4HCl) 。將三亞乙基四胺水合物(TETA水合物)溶于水(85±1kg)中，并在≤40℃下，用歷時(shí)≥1小時(shí)供料的濃鹽酸水溶液(200±5kg)酸化。檢查pH值(目標(biāo)pH＝1 .0)，并加入濃鹽酸水溶液直至pH≤1 .0。將反應(yīng)混合物冷卻至15?25℃，并攪拌≥10分鐘。用乙醇(672±5kg)處理溶液≥1 .5h，并保持溫度在≤30℃。將懸浮液冷卻至?5?5℃，并攪動≥30分鐘。過濾產(chǎn)品，并依次用乙醇(1x20kg，然后3x25kg)洗滌固體。將粗制三亞乙基四胺四鹽酸鹽(粗制TETA .4HCl)溶于水(340±10kg)。 [0321] ·用乙醇(909±10kg)處理溶液≥1 .5小時(shí)，并將溫度保持在≤30℃。將懸浮液冷卻至?5?5℃，并攪拌≥30分鐘。過濾產(chǎn)品，并依次用乙醇(1x14kg，然后3x15kg)洗滌固體。從純水和乙醇的混合物中重結(jié)晶粗制三亞乙基四胺四鹽酸鹽(粗制TETA 4HCl)。在B型晶種存在下， 通過從純水和乙醇的混合物中重結(jié)晶來進(jìn)一步純化粗制精胺四鹽酸鹽(粗制TETA 4HCl)，以得到三亞乙基四胺四鹽酸鹽(TETA 4HCl)。

步驟III生產(chǎn)精胺四鹽酸鹽(TETA .4HCl) 。粗制精胺四鹽酸鹽(粗制TETA .4HCl)溶于水(340±10kg)。用乙醇(909±15kg)處理溶液，所述乙醇供料歷時(shí)≥1 .5小時(shí)，保持溫度在7?13 ℃。在添加乙醇期間，將溶液用TETA .4HCl(2wt％)接種。 將懸浮液攪拌≥5小時(shí)，然后冷卻至?5℃并攪拌≥30分鐘。過濾產(chǎn)品，并依次用乙醇(1x14kg，然后3x15kg)洗滌固體。通過GC分析產(chǎn)品樣品的純度。產(chǎn)品在≤40℃的溫度下干燥，如果滿足干燥失重的控制參數(shù)，則將產(chǎn)品研磨。研磨后的原料藥在氮?dú)庀罗D(zhuǎn)移到雙層食品級聚乙烯袋中，然后放入鋁袋中并密封。鋁袋插入HDPE鼓中。通過GC測試重結(jié)晶后獲得的TETA 4HCl的雜質(zhì)。如果雜質(zhì)水平太高，則可以重復(fù)步驟III。

該方法從125kg的TETA中批量生產(chǎn)110?130kg的TETA 4HCl。包括兩次重結(jié)晶的粗制精胺四鹽酸鹽的合成的總收率為約50％[1]。

圖二 精胺四鹽酸鹽的精制步驟

參考文獻(xiàn)

[1]奧法蘭股份公司.三亞乙基四胺四鹽酸鹽的晶形及其醫(yī)藥用途:202411423442.7[P].2025-01-14.