背景及概述[1]
成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織中最常見而且數(shù)量較多的一種細(xì)胞,位于膠原纖維近旁并依附于其上。此細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)可隨其功能狀態(tài)的不同而改變。在功能活動(dòng)旺盛時(shí),成纖維細(xì)胞的胞體較大,呈扁平星形,有突起。胞核呈卵圓形,核染色質(zhì)較少,著色淺,核仁明顯。胞質(zhì)較多,弱鹼性,內(nèi)含豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核蛋白體、高爾基復(fù)合體以及微絲和微管等結(jié)構(gòu),表明此種細(xì)胞具有合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和多糖蛋白,形成膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維和基質(zhì)的作用。在相對(duì)靜止或功能活動(dòng)不活躍時(shí)的細(xì)胞,稱為纖維細(xì)胞。這種細(xì)胞比成纖維細(xì)胞小,輪廓不甚清楚,多呈梭形。胞質(zhì)少,弱嗜酸性,其中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體及其它細(xì)胞器均不發(fā)達(dá)。這表明纖維細(xì)胞是功能活動(dòng)不活躍的細(xì)胞。但在一定條件下,如創(chuàng)傷修復(fù),結(jié)締組織再生時(shí),纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為功能活躍的成纖維細(xì)胞,積極參與合成和分泌蛋白質(zhì),形成纖維和基質(zhì)。
大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞分離自正常大鼠肺動(dòng)脈組織,呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞在合成和分泌細(xì)胞因子、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞,均來自新鮮組織。細(xì)胞的培養(yǎng)采用大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
制備[2]
有研究探究氯化鈷對(duì)于原代大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞(PAF)的增殖、遷移、表型轉(zhuǎn)化作用的影響。分離培養(yǎng)大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞,利用氯化鈷刺激PAF細(xì)胞,并通過MTT、細(xì)胞劃痕、Transwell、表型轉(zhuǎn)化標(biāo)志蛋白測(cè)定以及PI3K/Akt信號(hào)通路蛋白的變化研究氯化鈷對(duì)PAF的影響。結(jié)果:MTT結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,氯化鈷可以抑制大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞的增殖活性(P<0.001),并呈濃度依賴性。劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell實(shí)驗(yàn)提示較高氯化鈷(200μmol·L-1)處理PAF細(xì)胞后可以抑制細(xì)胞遷移。隨濃度增加,氯化鈷可以抑制PAF的P110α、p-Akt蛋白表達(dá)。結(jié)論:氯化鈷對(duì)于體外培養(yǎng)的原代大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞的增殖、遷移和表型轉(zhuǎn)化特性有一定的抑制作用,這可能與氯化鈷抑制PI3K/Akt信號(hào)通路的表達(dá)有關(guān)。
主要參考資料
[1] 運(yùn)動(dòng)解剖學(xué)、運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)大辭典
[2] 氯化鈷對(duì)原代大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞的影響