背景及概述[1][2]
匹伐他汀也被稱(chēng)為NK-104、伊伐他汀和尼伐他汀。匹伐他汀鈣的化學(xué)名稱(chēng)為（3R，5S）-7-[2-環(huán)丙基-4-（4-氟苯基）喹啉-3-基]-3，5-二羥基-6（E）-庚酸半鈣鹽。匹伐他汀的中間體匹伐他汀乙酯存在對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體，其分子在位置3和5具有兩個(gè)手性中心。其中，（-）-（3S，5S）-7-[2-環(huán)丙基-4-（4-氟苯基）喹啉-2-基]-3，5-二羥基-6（E）-庚烯酸酯如式Ⅱ所示，（-）-（3S，5R）-7-[2-環(huán)丙基-4-（4-氟苯基）喹啉-2-基]-3，5-二羥基-6（E）-庚烯酸酯如式Ⅲ所示，（-）-（3R，5R）-7-[2-環(huán)丙基-4-（4-氟苯基）喹啉-2-基]-3，5-二羥基-6（E）-庚烯酸酯。他汀類(lèi)藥物的作用機(jī)制為3-羥-3-甲基-戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶抑制劑，可競(jìng)爭(zhēng)性抑制HMG-COA還原酶的活性。最近研究發(fā)現(xiàn)，他汀類(lèi)藥物不僅能明顯降低血脂，而且還有保護(hù)心腦血管功能的作用。匹伐他汀鈣是由日產(chǎn)化學(xué)公司和興株式會(huì)社開(kāi)發(fā)的個(gè)全合成的HMG-COA還原酶抑制劑，其臨床中顯示的強(qiáng)大的降脂效果而被譽(yù)為“超級(jí)他汀”，匹伐他汀鈣降脂效果非常好，是迄今為止較強(qiáng)效的降脂藥物。
制備[1]
匹伐他汀乙酯制備如下：
1）在氮?dú)鈿夥障拢瑢浠c(20.8g，純度59.5％，515mmol)和THF(200mL)裝入燒瓶中并冷卻至17℃。向該混合物在2hr內(nèi)逐滴添加DHAB(53.9g，純度91.9％，247.1mmol)在THF(200mL)中的溶液，并在所述逐滴添加完成后將溶液在25℃攪拌13hr。
2）向攪拌后的所述溶液在4hr內(nèi)逐滴添加PT-ALD(40.0g，137.3mmol)在THF(400mL)中的溶液，并在所述逐滴添加完成后將溶液在25℃攪拌1hr。通過(guò)HPLC對(duì)攪拌后的溶液進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)向PT-DOXB的轉(zhuǎn)化率為99.2％。
3）將有機(jī)層用4wt％氯化鈉水溶液、10wt％檸檬酸水溶液和10wt％氯化鈉水溶液洗滌。通過(guò)HPLC對(duì)得到的有機(jī)層進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)PT-DOXB的產(chǎn)率為88.2％。
4）將所得有機(jī)層在減壓下濃縮并添加乙醇(200mL)。將得到的溶液在壓熱釜(密封容器)中加熱至內(nèi)部溫度為100℃-105℃并維持。在進(jìn)行10hr后，通過(guò)HPLC分析得到的溶液，發(fā)現(xiàn)向PT-DOXE的轉(zhuǎn)化率為99.0％。將得到的溶液冷卻至64℃并攪拌1hr。將攪拌后的所述溶液逐漸冷卻到0℃至-5℃，并通過(guò)過(guò)濾回收晶體。
5）將得到的晶體和乙醇(200mL)裝入燒瓶中并加熱到乙醇回流的溫度。隨后，將混合物冷卻至內(nèi)部溫度為70℃并攪拌1hr。將攪拌后的溶液逐漸冷卻到0℃至-5℃，通過(guò)過(guò)濾回收所述晶體并在減壓下干燥。通過(guò)HPLC分析得到的晶體，發(fā)現(xiàn)PT-DOXE的純度為99.1面積％，并且量為39.7g(產(chǎn)率64.9％)。
6）將離子交換水(57mL)、單水合葡萄糖(30g，151.5mmol)、NADP+(30mg，0.04mmol)、磷酸二氫鉀(2.76g，20.3mmol)和磷酸氫二鉀(0.39g，2.3mmol)裝入250mL發(fā)酵罐中并在其中溶解。向其添加通過(guò)參考例1的方法制備的重組大腸埃希氏桿菌JM109/pKV32OCR1-GDH的冷凍的細(xì)菌細(xì)胞(45g)和通過(guò)將以與實(shí)施例1類(lèi)似的方法獲得的PT-DOXE(1.2g，2.69mmol)溶解在二甲基亞砜(DMSO)(36.3g)中而制備的全部量的底物溶液，并通過(guò)在50℃的內(nèi)部溫度下攪拌4hr將所述混合物進(jìn)行反應(yīng)。在反應(yīng)期間，逐滴添加25wt％氫氧化鈉水溶液以維持pH6。將得到的反應(yīng)混合物用乙腈稀釋36倍，通過(guò)孔眼尺寸為0.2nm的濾膜過(guò)濾并得到濾液。通過(guò)HPLC分析所述濾液，發(fā)現(xiàn)從PT-DOXE向PT-DOLE的轉(zhuǎn)化率為85.7％。
主要參考資料
[1]CN201210516723.8匹伐他汀酯的新晶型及其制備方法