富馬酸替諾福韋是美國Gilead公司開發(fā)上市的一種核苷酸類抗病毒藥，于2001年經(jīng)美國FDA批準(zhǔn)用于治療人免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus，HIV)感染。2002年在歐盟上市，批準(zhǔn)用于HIV-1和慢性乙型肝炎的治療。富馬酸替諾福韋酯作為核苷酸逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，是一種可口服的開環(huán)核苷酸磷酸酯類前藥，口服吸收后迅速轉(zhuǎn)變成替諾福韋而發(fā)揮藥效。由于生物利用度高、療效確切且耐受性好，TDF現(xiàn)已成為推薦使用的一線抗HIV藥物，銷售額最高。專利文獻(xiàn)報道了富馬酸替諾福韋酯的合成方法，但存在部分中間體雜質(zhì)多、光學(xué)純度低、操作困難、收率低、富馬酸含量不合格及不適于工業(yè)生產(chǎn)等問題。替諾福韋酯是替諾福韋雙異丙酰氧基甲酯延胡索酸鹽，是替諾福韋的酯類前體，是一種無環(huán)的5'-單磷酸腺苷類似物，具有廣譜抗病毒作用，可抑制HIV-1、HIV-2的反轉(zhuǎn)錄酶及HBV聚合酶，從而抑制病毒復(fù)制。口服后，TDF水解為替諾福韋，后者被細(xì)胞激酶磷酸化成具有藥理活性的代謝產(chǎn)物替諾福韋二磷酸，后者與5'-三磷酸脫氧腺苷酸競爭，參與病毒DNA的合成，進(jìn)入病毒DNA后由于缺乏3'-OH而導(dǎo)致DNA延長受阻，從而抑制病毒的復(fù)制。富馬酸替諾福韋用于有病毒復(fù)制證據(jù)以及和血清轉(zhuǎn)氨酶(ALT或AST)持續(xù)升高或肝活動性病變證據(jù)的CHB成年患者。包括HBeAg陽性或HBeAg陰性的代償期CHB的成年患者。Tenofovir Disoproxil Fumarate (GS-1278, Tenofovir DF)屬于一類抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物，其通過與天然底物脫氧腺苷5’-三磷酸鹽競爭以及整合到DNA后終止DNA鏈抑制HIV reverse transcriptase活性。

Target	Value
HIV reverse transcriptase (Cell-free assay)

Tenofovir的循環(huán)經(jīng)腎臟通過腎小球濾過和腎小管主動分泌。Tenofovir不是人有機(jī)陽離子轉(zhuǎn)運1型（hOCT1）或hOCT2的底物。在MRP4過表達(dá)細(xì)胞中，Tenofovir積累到五倍較低水平，MRP抑制劑可提高其累積。 在人肝母細(xì)胞瘤（肝癌）細(xì)胞，骨骼肌細(xì)胞（SkMCs）或腎近端小管上皮細(xì)胞中，Tenofovir并不顯著影響線粒體DNA（mtDNA）的。在HepG2細(xì)胞或SkMCs中，Tenofovir升高的乳酸生產(chǎn)小于20％。 在HepG2細(xì)胞和人原代肝細(xì)胞中，Tenofovir是替諾福韋二磷酸（TFV-DP）有效的磷酸化。在基于細(xì)胞的測定中，Tenofovir抗HBV的50％有效濃度是1.1 mM，加入bis-isoproxil前基團(tuán)之后有效率提高50倍。在體外和臨床中，Tenofovir對lamivudine耐藥HBV有充分的活動。 Tenofovir抑制肝源性肝癌細(xì)胞和正常骨骼肌細(xì)胞的增殖，CC（50）值分別為398 μM和870 μM。Tenofovir比cidofovir對腎近曲小管上皮細(xì)胞的增殖和生存能力影響弱，cidofovir具有潛在的相關(guān)的核苷酸類似物誘導(dǎo)腎小管功能障礙。

核苷酸逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，是泰諾福韋（PMPA，2）的前藥，臨床主要用于治療人類免疫缺陷病毒感染

以氯甲基碳酸異丙酯、富馬酸及(R)-(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基)氧基)甲基)磷酸為原料，合成(R)-(((((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙烷-2-基)氧基)甲基)磷酰基)雙(氧基)雙(亞甲基)二異丙基二碳酸酯富馬酸鹽的一般步驟如下：在反應(yīng)釜中加入替諾福韋（PMPA）4.0g、N-甲基吡咯烷酮15mL及三乙胺5.8mL。將反應(yīng)混合物加熱至63℃并攪拌30分鐘，隨后加入氯甲基異丙基碳酸酯10g，保持該溫度繼續(xù)攪拌4小時。反應(yīng)完成后，將混合物冷卻至室溫，進(jìn)一步冷卻至5℃，并緩慢加入預(yù)冷至15℃以下的蒸餾水25mL。在15℃下攪拌1小時后，用二氯甲烷15mL進(jìn)行兩次萃取。合并有機(jī)層，用蒸餾水10mL洗滌兩次，隨后用硫酸鎂干燥。過濾后，減壓濃縮有機(jī)層，得到替諾福韋地索普西（TD）油狀物。將TD油狀物溶解于異丙醇35mL中，加入富馬酸1.6g，升溫至50℃攪拌至完全溶解。隨后緩慢冷卻至25℃，再進(jìn)一步冷卻至3℃，保持此溫度攪拌4小時。過濾析出的晶體，用異丙醇洗滌，并于40℃下真空干燥，得到替諾福韋地索普西富馬酸鹽（TDF）4.7g，產(chǎn)率53%。將所得TDF 4.7g溶解于異丙醇40mL中，加熱至50℃攪拌至完全溶解。緩慢冷卻至25℃，再冷卻至3℃，保持此溫度攪拌4小時。過濾晶體，用異丙醇洗滌，并于40℃下真空干燥，最終獲得TDF晶型4.3g，產(chǎn)率90%。

參考文獻(xiàn)：

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